[发明专利]间充质干细胞来源的纳米微囊泡在制备治疗子痫前期的药物中的应用在审
| 申请号： | 202110207297.9 | 申请日： | 2021-02-24 |
| 公开（公告）号： | CN114081900A | 公开（公告）日： | 2022-02-25 |
| 发明（设计）人： | 王凤鸽;张斌;满冬梅;赵柔;刘淼;魏利;梁敬;陈彦戎;魏东 | 申请（专利权）人： | 济宁医学院附属医院 |
| 主分类号： | A61K35/28 | 分类号： | A61K35/28;A61P15/00;C12N5/0775 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 薛红凡 |
| 地址： | 272100 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 间充质 干细胞 来源 纳米 微囊泡 制备 治疗 前期 药物 中的 应用 | ||
1.间充质干细胞来源的纳米微囊泡在制备治疗子痫前期的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述间充质干细胞来源的纳米微囊泡的制备方法，包括以下步骤：
1)将hucMSC体外扩增培养，待细胞汇合度达到75％～80％时收集培养上清液，去除细胞碎块后，得到MSC-CM；
2)将所述MSC-CM去除细胞碎片和细胞器后进行超滤洗涤，收集浓缩液；
3)将所述浓缩液转移至质量浓度30％的庶糖/D2O密度垫上进行密度梯度离心，收集底部缓冲垫；
4)将所述底部缓冲垫稀释洗涤后进行所述超滤洗涤，收集微囊泡浓缩液除菌得到间充质干细胞来源的纳米微囊泡。
3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，步骤1)中去除细胞碎块的方法包括离心；所述离心的离心力为1800～2200g，所述离心的时间为8～12min。
4.根据权利要求2所述应用，其特征在于，步骤2)中去除细胞碎片和细胞器包括差速离心；所述差速离心的离心力为1500～2200rpm，所述差速离心的时间为15～30min。
5.根据权利要求2所述应用，其特征在于，步骤2)或步骤4)中所述超滤洗涤采用100000Da MWCO超滤离心管进行。
6.根据权利要求2所述应用，其特征在于，步骤3)中所述密度梯度离心的离心力为100000g，所述密度梯度离心的时间为3h；所述密度梯度离心的温度为4℃。
7.根据权利要求2～6任意一项所述应用，其特征在于，所述间充质干细胞来源的纳米微囊泡的表面标记蛋白包括CD63和CD9。
8.根据权利要求7所述应用，其特征在于，所述药物的剂型为注射剂；
在所述注射剂中，间充质干细胞来源的纳米微囊泡的浓度不低于4.5×1011微粒数/0.4ml。
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