[发明专利]一种同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法

权利要求书

1.一种同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于，采用反相超高效液相色谱法，包括以下步骤：

S1标准储备液配制：分别称取α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的标准品，加无水乙醇溶解，定容，分别配制成浓度均为1000μg/mL的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的标准储备液；

S2标准中间液配制：分别量取步骤S1配制得到的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的标准储备液，加入棕色容量瓶，用无水乙醇定容至刻度，配制成浓度均为100μg/mL的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的中间液；

S3标准工作液配制：分别从步骤S2配制得到的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的中间液中取样，加入棕色容量瓶，用丙酮定容至刻度；分别配制成得到浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的α-生育酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的β-生育酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的γ-生育酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的δ-生育酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的α-生育三烯酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的β-生育三烯酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的γ-生育三烯酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的δ-生育三烯酚系列标准工作液；

S4待测样预处理：取待测植物油样品，加入1-2%待测植物油样品重量的含磷分子筛，混合均匀，密封静置不少于240min，过滤，取滤液，制得脱胶样品；取脱胶样品，加入丙酮溶解，混合均匀，制得待测试样溶液；

S5液相色谱检测：分别将标准工作液和待测试样溶液注入液相色谱柱进行检测，测出峰面积，计算出各维生素E异构体含量；

所述液相色谱柱为PFP柱，规格为4.6mm×100mm，2.7μm；流动相为甲醇与水组合物；

所述含磷分子筛为VPI-5分子筛；

所述步骤S4取VPI-5分子筛，500-600℃活化不少于60min，降至室温，制得活化VPI-5分子筛；向待测植物油样品加入活化VPI-5分子筛，混合均匀，密封静置不少于240min，过滤，取滤液，制得脱胶样品。

2.根据权利要求1所述的同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于：所述流动相为甲醇与水按97:3的体积比组成的组合物。

3.根据权利要求1所述的同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于：所述液相色谱检测温度为30℃，进样量为1μL；流动相流速为0.4mL/min，洗脱方式为等度洗脱。

4.根据权利要求1所述的同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于：所述液相色谱采用荧光检测器检测。

5.根据权利要求4所述的同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于：所述荧光检测器的激发波长为295nm，发射波长为330nm。

6.根据权利要求1所述的同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于：所述步骤S4称取1.000g的脱胶样品，用10mL丙酮溶解，涡旋混合器上充分混匀后，过0.22μm尼龙滤膜后，制得待测试样溶液。

7.根据权利要求1所述的同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于，还包括VPI-5分子筛再生处理步骤：向步骤S4使用后的VPI-5分子筛中加入不少于4倍VPI-5分子筛重量的氯仿，混合均匀，过滤，烘干，制得再生VPI-5分子筛。