[发明专利]AAV介导的人脂蛋白脂酶肝脏异位表达载体及其用途

权利要求书

1.一种优化的人脂蛋白脂酶基因表达框，其包含：

(1)如SEQ ID NO:5所示的启动子序列或者与其具有至少约90％同一性的启动子序列；

(2)插入有SEQ ID NO:2所示的内含子序列或者插入有与SEQ ID NO:2具有至少约90％同一性的内含子序列的编码功能性脂蛋白脂酶(例如，LPL-S447X)的核苷酸序列，例如，

(i)如SEQ ID NO:3所示的优化的编码LPL-S447X的核苷酸序列；

(ii)与如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列互补的核苷酸序列；

(iii)与(i)或(ii)的核苷酸序列编码相同的LPL-S447X，但因遗传密码的简并性而与(i)或(ii)的核苷酸序列不同的核苷酸序列；或

(iv)与(i)或(ii)或(iii)所述核苷酸序列具有至少70％同一性的序列；和

(3)至少一个(例如，2－8个)SEQ ID NO:6所示的人miR-142-3p靶序列，例如，具有4个串联的人miR-142-3p靶序列，例如，SEQ ID NO:7所示的人miR-142-3p靶序列。

2.根据权利要求1所述的优化的人脂蛋白脂酶基因表达框，其还包含：

(4)如SEQ ID NO:10所示的或者与其具有至少约90％同一性的BGH polyA序列；和/或

(5)如SEQ ID NO:11所示的或者与其具有至少约90％同一性的TBG增强子序列。

3.根据权利要求2所述的基因表达框，其碱基全序列如SEQ ID NO:12所示或与SEQ IDNO:12具有至少约90％同一性，特征在于，表达框表达产物为LPL-S447X。

4.一种病毒载体，其特征在于，包含权利要求1－3中任一项所述的优化的人脂蛋白脂酶基因表达框。

5.一种用于预防和/或治疗严重高甘油三酯血症或其引起的疾病如急性胰腺炎的基因药物，特征在于，

(1)该基因药物是一种病毒载体；

(2)该病毒载体包含权利要求1－3中任一项所述的优化的人脂蛋白脂酶基因表达框；和

(3)将该基因药物静脉注射，通过肝脏特异性表达人脂蛋白脂酶(例如，LPL-S447X)来达到预防和/或治疗严重高甘油三酯血症或其引起的疾病如急性胰腺炎的目的，

例如，所述严重高甘油三酯血症或其引起的疾病如急性胰腺炎是LPL基因缺陷和/或GPIHBP1基因缺陷和/或高脂饮食诱发的。

6.根据权利要求4所述的病毒载体或根据权利要求5所述的基因药物，其特征在于，

(1)所述病毒载体是重组腺相关病毒载体；和/或

(2)所述病毒载体的基因组可自我互补形成双链DNA分子。

7.根据权利要求6所述的病毒载体或基因药物，其特征在于，所述重组腺相关病毒载体是选自AAV1、AAV2、AAV3B、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAVrh.10或它们的组合的血清型的重组腺相关病毒载体，优选的血清型为AAV5、AAV3B、AAV8、AAV9。

8.根据权利要求1－3中任一项所述的优化的人脂蛋白脂酶基因表达框和根据权利要求4、6和7中任一项所述的病毒载体的用途，用于制备预防和/或治疗高甘油三酯血症或其引起的疾病如急性胰腺炎的基因药物，例如，用于制备预防和/或治疗LPL基因缺陷和/或GPIHBP1基因缺陷和/或高脂饮食诱发的高甘油三酯血症或其引起的疾病如急性胰腺炎的基因药物。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，所述基因药物的给药方式为静脉注射，所述高甘油三酯血症是LPL基因缺陷和/或GPIHBP1基因缺陷和/或高脂饮食引起的高甘油三酯血症。

10.根据权利要求8或权利要求9所述的用途，其特征在于，所述基因药物的一次给药可持续降低体内的血浆TG浓度，由此预防和/或治疗高甘油三酯血症，特别地，预防和/或治疗严重的高甘油三酯血症。