[发明专利]一种白及多糖及其制备方法和应用、包含所述白及多糖的免疫佐剂和纳米疫苗有效
申请号: | 202110328789.3 | 申请日: | 2021-03-27 |
公开(公告)号: | CN115124628B | 公开(公告)日: | 2023-03-31 |
发明(设计)人: | 胡江苗;刘野;杨柳;陈思思;李金玉 | 申请(专利权)人: | 中国科学院昆明植物研究所;中国医学科学院医学生物学研究所 |
主分类号: | A61K39/39 | 分类号: | A61K39/39;C08B37/00;A61K31/715;A61P37/02;A61P37/04;B82Y5/00;A61K39/215;A61P31/14;A61K8/73;A61Q19/00;A23L33/125;A61K36/898 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 张梦泽 |
地址: | 650201 *** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 白及 多糖 及其 制备 方法 应用 包含 免疫佐剂 纳米 疫苗 | ||
1.一种白及多糖,化学结构式如式I所示;
式I;
所述白及多糖的相对分子量为42.4KDa;
所述白及多糖的单糖由甘露糖和葡萄糖构成;所述白及多糖的单糖构成为甘露糖:葡萄糖=3.08:1;所述白及多糖的重复序列为1,4-β-D-葡萄糖A、1,4,6-β-D-甘露糖C和1,4-β-D-甘露糖B按式I的重复单元为主链,单元C上乙酰基摩尔百分比含量为7.54%。
2.权利要求1所述白及多糖的制备方法,包括以下步骤:
1)对白及块茎粉进行脱脂处理,得到脱脂原料;
2)将所述脱脂原料和水混合进行水提,得到水提液;
3)采用乙醇对所述水提液进行醇沉,固液分离,收集沉淀;
4)对所述沉淀进行脱蛋白处理,得到白及粗多糖;
5)依次采用水和浓度为0.05mol/L的NaCl水溶液对所述白及粗多糖进行第一色谱柱层析,收集NaCl水溶液的洗脱部分;采用水对NaCl水溶液的洗脱部分进行第二色谱柱层析,收集洗脱液,对所述洗脱液进行HPLC-ELSD检测,收集出峰时间为9.32min的组分,得到白及多糖。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤3)中所述采用乙醇对所述水提液进行醇沉包括:对所述水提液依次进行过滤和浓缩,得到浓缩液;将所述浓缩液和乙醇混合,得到混合液,静置进行醇沉;所述混合液中乙醇的体积浓度>70%。
4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤4)中所述脱蛋白处理包括:对所述沉淀复溶,得到复溶液;将所述复溶液与Sevage试剂按照体积比为4:1 的比例混合、振荡、离心,变性后的蛋白质介于复溶液与Sevage试剂交界处;所述Sevage试剂是将氯仿和正丁醇按照4:1的体积比混合得到。
5.权利要求1所述白及多糖或者权利要求2~4任意一项所述制备方法制备得到的白及多糖在制备免疫调节产品中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述免疫调节产品包括免疫调节药品、免疫调节化妆品或免疫调节功能食品。
7.权利要求1所述白及多糖或者权利要求2~4任意一项所述制备方法制备得到的白及多糖作为免疫佐剂在制备疫苗中的应用。
8.一种纳米疫苗,包括多糖和蛋白疫苗,所述多糖为权利要求1所述白及多糖或者权利要求2~4任意一项所述制备方法制备得到的白及多糖;
所述蛋白疫苗包括SARS-CoV-2 RBD蛋白。
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