[发明专利]一种前脂肪细胞的分离方法在审
申请号: | 202110381028.4 | 申请日: | 2021-04-09 |
公开(公告)号: | CN113174367A | 公开(公告)日: | 2021-07-27 |
发明(设计)人: | 万荣 | 申请(专利权)人: | 百色学院 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077 |
代理公司: | 北京邦中知识产权代理有限公司 11827 | 代理人: | 付佳 |
地址: | 533000 广西*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脂肪 细胞 分离 方法 | ||
1.一种前脂肪细胞的制备方法,其特征在于,所述的方法包括步骤:
(1)将脂肪与Ⅰ型胶原酶溶液混合后进行孵育消化,得到消化液;
(2)所述的消化液经中和液中和后,过滤,得到滤液;
(3)所述滤液经离心后,收集沉淀,得到前脂肪细胞。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤(1)中,所述的脂肪与所述Ⅰ型胶原酶溶液的重量比为0.5-1.5:0.5-1.5,较佳地0.8-1.2:0.8-1.2,更佳地1:1。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤(1)中,在所述Ⅰ型胶原酶溶液中,Ⅰ型胶原酶的含量为0.5-1mg/mL,较佳地0.8mg/mL,更佳地1mg/mL。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤(1)中,所述孵育消化的温度为20-40℃,较佳地30-37℃,更佳地37℃。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤(1)中,所述孵育消化的时间为0.5-1.5h,较佳地0.8-1.2h,更佳地1h。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤(2)中,所述的中和液包括添加有FBS的基础培养基。
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,在所述添加有FBS的基础培养基中,FBS的含量为5-15v/v%,较佳地8-12v/v%,更佳地10v/v%。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤(2)中,所述的中和液与所述的消化液的体积比0.5-1.5:0.5-1.5,较佳地0.8-1.2:0.8-1.2,更佳地1:1。
9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤(3)中,得到的所述前脂肪细胞经添加有FBS的基础培养重悬,得到前脂肪细胞重悬液。
10.一种前脂肪细胞,其特征在于,所述的前脂肪细胞通过如权利要求1所述的方法制备获得。
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