[发明专利]一种齐墩果酸季铵盐-肝素-壳聚糖纳米粒的制备方法及其应用

说明书

本发明涉及齐墩果酸季铵盐‑肝素‑壳聚糖纳米粒的制备方法及其应用，有效解决齐墩果酸季铵盐‑肝素‑壳聚糖纳米粒的制备，实现在制备抗炎、降压、抗癌、抗菌药物中的应用，提高药物吸收率和疗效问题，齐墩果酸用溶剂溶解，加入N,N‑二异丙基乙胺、1‑乙基‑3(3‑二甲基丙胺)碳二亚胺和1‑羟基苯并三唑，超声反应，加入N,N‑二甲基乙二胺，酰胺化反应，得中间体化合物，有机溶剂溶解，加入无机碱和碘甲烷，得齐墩果酸季铵盐溶于甲醇，加入肝素去离子水溶液，搅拌过夜，蒸发为薄膜，水化薄膜，探针超声，离心，上清液过滤，得齐墩果酸季铵盐‑肝素纳米粒溶液，滴加到壳聚糖醋酸溶液中，离心，上清液过滤，得齐墩果酸季铵盐‑肝素‑壳聚糖纳米粒。

技术领域

本发明涉及医药，特别是一种齐墩果酸季铵盐-肝素-壳聚糖纳米粒的制备方法及其应用。

背景技术

齐墩果酸( oleanolic acid，OA)为齐墩果烷型五环三萜类化合物，是一种天然植物提取物，以游离形式或与糖结合成苷形式广泛分布于自然界，存在于木犀科植物齐墩果的叶、女贞果实；龙胆科植物川西獐牙菜、青叶胆全草；伞形科植物大星芹的叶和根；五加科植物德木的根皮及茎皮；葫芦科植物大籽雪胆、可爱雪胆、中华雪胆（金龟莲、罗锅底）的块根中。具有保肝、抗炎、抗病毒、抗氧化、调节免疫等多种药理作用。OA的水溶性小，口服吸收差，但鉴于其确切的药理作用，国内外学者对其修饰做了大量的研究工作。将OA作先导化合物，来合成OA的衍生物，并通过研究所得衍生物来筛选和发掘生物活性潜力更大的物质。齐墩果酸的五环三萜骨架的刚性较强，同时结构中缺少水溶性片段，因此导致其水溶性较差，而水溶性较差则直接影响生物利用度和生物活性。纳米技术可以提高药物溶解度，稳定性，生物利用度等，近年来研究表明齐墩果酸其衍生的制剂可通过调节细胞内线粒体信号通路发挥抗乳腺癌活性。肝素（Heparin，HEP）是生理pH下表现负电性的聚阴离子多糖，线性糖链中的磺酸基和羧基通过静电相互作用能够与显正电性的化合物结合，譬如肝素与带正电荷的小檗碱或阿霉素形成复合物。壳聚糖(Chitosan，CS)是与哺乳动物细胞具有良好生物相容性的天然材料，由带阳离子的氨基葡萄糖残基组成多糖链。在肝素或壳聚糖纳米颗粒内引入疏水药物，可以确保低水溶性药物发挥抗肿瘤作用。针对齐墩果酸水溶性差，生物利用度低等，很难实现对肿瘤的有效治疗。基于聚阳离子和阴离子载体的前药递送系统，可以用于提高难溶性药物的溶解度。因此设计并合成一种齐墩果酸的前药，采用肝素和壳聚糖作为前药的载体构建纳米粒子，期望改善其吸收效率，提高其抗肿瘤药效是非常必要的，但至今未见有公开报导。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种齐墩果酸季铵盐-肝素-壳聚糖纳米粒（QDT-HEP-CS NPs）的制备方法及其应用，可有效解决齐墩果酸季铵盐-肝素-壳聚糖纳米粒的制备，实现在制备抗炎、降压、抗癌、抗菌药物中的应用，提高药物吸收率和疗效问题。

本发明解决的技术方案是，一种齐墩果酸季铵盐-肝素-壳聚糖纳米粒（QDT-HEP-CS NPs）的制备方法，包括以下步骤：

（1）、中间体化合物（QDN）的制备：