[发明专利]一种体外合成藏红花酸的方法有效
申请号: | 202110523493.7 | 申请日: | 2021-05-13 |
公开(公告)号: | CN113234696B | 公开(公告)日: | 2023-03-31 |
发明(设计)人: | 元英进;梁楠;肖文海;姚明东;王颖 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N9/06;C12N15/70;C12P7/44;C12R1/19 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 刘猛 |
地址: | 300073 天津市*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 体外 合成 藏红花 方法 | ||
1.一种体外合成藏红花酸的方法,其特征在于,包括:
步骤1、构建SEQ ID NO:2所示
步骤2、在含有FeSO4、L-抗坏血酸、TCEP、catalase和NAD+的缓冲液中加入玉米黄质和
步骤3、完成步骤2后再向缓冲液中添加
2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述宿主细胞为大肠杆菌细胞。
3.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述缓冲液中含0.2~1 mM FeSO4、0.5~2 mML-抗坏血酸、1~2 mM TCEP、1~3 mg/mL catalase和1~5 mM的 NAD+。
4.根据权利要求1或3所述方法,其特征在于,所述缓冲液为HEPES缓冲液。
5.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述表达质粒以pET28a系列质粒为基础质粒进行构建。
6.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述底物玉米黄质由有机溶剂、玉米黄质和Triton X-100组成,所述有机溶剂为乙醇和/或DMSO。
7.根据权利要求1所述方法,其特征在于,通过流加底物玉米黄质进行体外合成藏红花酸。
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