[发明专利]杂交瘤细胞、抗SARS-CoV-2的单克隆抗体及其应用

说明书

本发明涉及一种杂交瘤细胞、抗SARS‑CoV‑2的单克隆抗体及其应用。该杂交瘤细胞的保藏编号为GDMCC NO.61643，上述杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体对SARS‑CoV‑2的中和效价高，应用于检测SARS‑CoV‑2中和抗体的试剂盒时，可以使该检测试剂盒的灵敏度高，特异性好，且检测周期短，安全性高。

技术领域

本发明涉及免疫检测技术领域，特别是涉及一种杂交瘤细胞、抗SARS-CoV-2的单克隆抗体及其应用。

背景技术

新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)为单股正链RNA病毒，其表面覆盖有包膜和刺状蛋白，直径为75nm～160nm。SARS-CoV-2可以通过呼吸道飞沫传播和接触传播，具有较强的人群传播能力(基本传染数R0值为2.3左右)。在2019年11月份首次发现后，SARS-CoV-2已经引起全球大流行。至2021年5月10日，全球已有1亿5千多万人感染SARS-CoV-2病毒，病毒的感染和传播是当前全球公共卫生面临的最主要威胁。

目前，针对SARS-CoV-2病毒没有特效的药物，建立机体的免疫屏障是个体预防、治疗病毒感染及从群体角度控制疫情扩散的主要途径，及时准确的监测体内针对SARS-CoV-2特异的中和抗体水平十分重要。一方面，个体病毒感染后，中和抗体而非总抗体产生的水平和时间是评估可能导致疾病严重程度的重要指标；另一方面，中和抗体水平也是反映疫苗免疫保护效果的重要指标，是疫苗评估和质控的重要依据。因此，开发灵敏、准确的SARS-CoV-2中和抗体检测方法有助于对感染病例的预后评估。更为重要的，当前我国已有3亿多人接种完SARS-CoV-2疫苗，建立高通量的中和抗体检测方法对全面、科学地评估我国人群的中和抗体水平动态变化具有重要意义。

目前，检测SARS-CoV-2中和抗体的方法主要有包被病毒主要结构蛋白S(Spike)蛋白的间接酶联免疫吸附试验、微量中和试验和假病毒中和抗体检测等。然而，间接酶联免疫吸附试验的灵敏度和特异性较低；微量中和实验是测定SARS-CoV-2中和抗体的金标准，但由于方法是建立在体外细胞感染活病毒的基础上，需要在BSL-3级实验室内完成，并且检测周期偏长，不适合临床的评估和大人群范围的抗体水平监测。假病毒中和抗体检测虽然使用安全性较高的假病毒替代活病毒，不需要在BSL-3级实验室完成，但检测周期也较长(2～4天)不能满足临床检测和群体监测的需求。

发明内容

基于此，本发明提供一种杂交瘤细胞，该杂交瘤细胞产生的单克隆抗体对早期毒株及近期出现的抗原变异的毒株都具有中和作用，且效价高；应用在基于竞争法ELISA检测SARS-CoV-2中和抗体时，检测灵敏度高、特异性好，同时检测周期短、安全性高，不需要在BSL-3级实验室完成。

此外，本发明还提供一种该杂交瘤细胞产生的抗SARS-CoV-2的单克隆抗体和包括该单克隆抗体的试剂盒。

一种杂交瘤细胞，其特征在于，所述杂交瘤细胞的保藏编号为GDMCC NO.61643。

一种抗SARS-CoV-2的单克隆抗体，所述单克隆抗体由权利要求1所述的杂交瘤细胞分泌。

一种试剂盒，包括保藏编号为GDMCC NO.61643的杂交瘤细胞所产生的单克隆抗体。

在其中一个实施例中，所述试剂盒用于检测SARS-CoV-2中和抗体，所述试剂盒包括固相载体、抗原和标记有标记物的竞争物，所述抗原能与SARS-CoV-2中和抗体特异性结合，所述竞争物为保藏编号为GDMCC NO.61643的杂交瘤细胞所产生的单克隆抗体。

在其中一个实施例中，所述抗原选自灭活的SARS-CoV-2毒株2020XN4276。

在其中一个实施例中，所述固相载体选自多孔板、微量反应板凹孔、磁珠、纤维素膜和尼龙膜中的一种。