[发明专利]一种稳定性提高的蔗糖异构酶突变体及其构建方法有效

专利信息
申请号: 202110558173.5 申请日: 2021-05-21
公开(公告)号: CN113151237B 公开(公告)日: 2022-05-06
发明(设计)人: 张显;胡孟凯;唐梓桐;饶志明;王一迈;蔡超凡;卢杨;徐美娟;杨套伟 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N9/90 分类号: C12N9/90;C12N15/61;C12N15/70;C12N15/77;C12N1/21;C12P19/24;C12P19/12;C12R1/19;C12R1/125;C12R1/15;C12R1/865
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 赵巧娜
地址: 214000 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 稳定性 提高 蔗糖 异构酶 突变体 及其 构建 方法
【权利要求书】:

1.一种蔗糖异构酶突变体,其特征在于,所述突变体为:

将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖异构酶的第280位的缬氨酸突变为亮氨酸得到的;

或将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖异构酶的第499位的丝氨酸突变为苯丙氨酸得到的;

或将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖异构酶的第280位缬氨酸突变为亮氨酸,同时将第499位的丝氨酸突变为苯丙氨酸得到的。

2.编码权利要求1所述的蔗糖异构酶突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的重组载体。

4.如权利要求3所述的重组载体,其特征在于,以pXMJ19载体、pMA5载体、pHT43载体、pET-20b(+)载体和pDXW-10载体中的任一种作为表达载体。

5.携带权利要求2所述基因,或权利要求3或4所述重组载体的重组细胞。

6.如权利要求5所述的重组细胞,其特征在于,所述重组细胞以大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)、酵母菌(Saccharomyces)中的任一种为表达宿主。

7.一种提高蔗糖异构酶热稳定性的方法,其特征在于,所述方法为,

将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖异构酶的第280位的缬氨酸突变为亮氨酸;

或将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖异构酶的第499位的丝氨酸突变为苯丙氨酸;

或将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖异构酶的第280位缬氨酸突变为亮氨酸,同时将第499位的丝氨酸突变为苯丙氨酸。

8.权利要求3或4所述的重组载体或权利要求5或6所述的重组细胞在制备蔗糖异构酶中的应用。

9.权利要求1所述突变体或权利要求2所述基因或权利要求3或4所述的重组载体或权利要求5或6所述的重组细胞在转化蔗糖生产异麦芽酮糖中的应用。

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