[发明专利]一种支原体疫苗及其制备方法有效
| 申请号： | 202110597085.6 | 申请日： | 2021-05-31 |
| 公开（公告）号： | CN113546162B | 公开（公告）日： | 2023-07-18 |
| 发明（设计）人： | 张珍珍;冯志新;张超;王海燕;熊祺琰 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | A61K39/02 | 分类号： | A61K39/02;A61K9/127;A61K47/46;A61K47/60;A61P31/04;B82Y5/00;B82Y40/00 |
| 代理公司： | 南京汇盛专利商标事务所(普通合伙) 32238 | 代理人： | 袁静 |
| 地址： | 210014 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 支原体 疫苗 及其 制备 方法 | ||
1.一种支原体疫苗，其特征在于：是以猪肺炎支原体膜为抗原，以巨噬细胞的细胞膜为载体材料，采用DSPE-PEG2000修饰的粒径为50-500 nm的支原体疫苗；所述疫苗是采用如下方法制备：（1）分别制备猪肺炎支原体膜和巨噬细胞膜；（2）将所述支原体膜和巨噬细胞膜混合，得到混合膜悬浮液；将所述混合膜悬浮液与DSPE-PEG2000水溶液混合均匀，使用脂质体挤出仪挤压过膜，得到所述疫苗；所述混合膜液中支原体膜和巨噬细胞膜的质量比为1:0.1-2；DSPE-PEG2000水溶液与混合膜悬浮液的体积比为1:8-10，所述DSPE-PEG2000水溶液的浓度为4-6mg/ml。
2.根据权利要求1所述疫苗，其特征在于所述巨噬细胞膜是采用干扰素γ诱导后的巨噬细胞膜。
3.权利要求1所述疫苗的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
（1）分别制备猪肺炎支原体膜和巨噬细胞膜；
（2）将所述支原体膜和巨噬细胞膜混合，得到混合膜悬浮液；将所述混合膜悬浮液与DSPE-PEG2000水溶液混合均匀，使用脂质体挤出仪挤压过膜，得到所述疫苗。
4.根据权利要求3所述疫苗的制备方法，其特征在于所述支原体膜和巨噬细胞膜分别采用如下方法制备：将支原体或免疫细胞用PMSF水溶液重悬，在冰水浴中孵育，冻融，然后离心，收集支原体膜或免疫细胞膜。
5.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于所述巨噬细胞膜来源于干扰素γ诱导培养的巨噬细胞。
6.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于所述干扰素γ诱导培养的浓度为20-50ng/ml，诱导培养时间为20-28小时。
7.根据权利要求6所述制备方法，其特征在于所述混合膜液中支原体膜和巨噬细胞膜的质量比为1:0.1-2；DSPE-PEG2000水溶液与混合膜悬浮液的体积比为1:8-10，所述DSPE-PEG2000水溶液的浓度为4-6mg/ml。
8.根据权利要求7所述制备方法，其特征在于所述混合膜液中支原体膜和巨噬细胞膜的浓度分别为1-3mg/ml。
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