[发明专利]一种具有过氧化物酶催化活性的磁性纳米酶材料及其检测诺如病毒的试剂盒和应用

说明书

本发明提供了一种具有过氧化物酶催化活性的磁性纳米酶材料及其检测诺如病毒的试剂盒和应用，属于病毒检测技术领域。一种具有过氧化物酶催化活性的磁性纳米酶材料，由ZnFe₂O₄@COF和金纳米粒子原料制成。本发明还提供了一种特异性检测诺如病毒的磁性纳米复合酶，是由特异性诺如病毒识别生物材料结合在所述磁性纳米酶材料的金纳米粒子上形成的，不仅能特异性识别和结合诺如病毒而且具有高效的辣根过氧化物酶催化活性，能够完全替换传统ELISA检测中辣根过氧化物酶标记的二抗，实现非生理条件下诺如病毒的检测。本发明提供的检测试剂盒具有检测操作方便、成本低，检测高通量高，具有较高的使用价值。

技术领域

本发明属于病毒检测技术领域，具体涉及一种具有过氧化物酶催化活性的磁性纳米酶材料及其检测诺如病毒的试剂盒和应用。

背景技术

诺如病毒(norovirus，NoV)是一种线性单链正向RNA病毒，属于杯状病毒科，是继轮状病毒后可引起人急性胃肠炎流行和暴发的主要病原体。目前，诺如病毒还没有可以使用的疫苗，因此，准确快速检测NoV，对于临床医生的快速诊断以及患者获得更佳治疗具有重要意义。

目前，酶联免疫吸附测定法(ELISA)仍然是最常使用的诺如病毒检测方法，具有快速、高通量和低成本等优点。国内外已报道的体内诺如病毒浓度的ELISA检测方法，主要是以抗原抗体反应为依据，利用二抗上偶联的辣根过氧化物酶(HRP)的底物显色作用，实现检测。但由于天然酶HRP在非生理条件下不稳定，容易变性失活，这给传统的ELISA检测的推广应用带来了不便。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种具有过氧化物酶催化活性的磁性纳米酶材料，具有优异的辣根过氧化物酶活性，增加检测灵敏度。

本发明提供了一种具有过氧化物酶催化活性的磁性纳米酶材料AuNPs@ZnFe₂O₄@COF，由以下原料制成：ZnFe₂O₄@COF和金纳米粒子；

所述ZnFe₂O₄@COF的质量和金纳米粒子的摩尔比为0.1～5mg：2～10μmol。

优选的，所述ZnFe₂O₄@COF的质量和金纳米粒子的摩尔比为0.5～3mg：4～8μmol。

优选的，所述ZnFe₂O₄@COF的制备方法，包括以下步骤：

1)将1,3,5-三(4-氨基苯基)苯、对苯二甲醛和ZnFe₂O₄溶解于二甲基亚砜中，得到预混合溶液；

2)在无水乙酸的作用下，将所述预混合溶液进行复合反应，得到的反应物为ZnFe₂O₄@COF。

优选的，所述1,3,5-三(4-氨基苯基)苯、对苯二甲醛和ZnFe₂O₄的质量比为0.1～0.8：0.01～0.2：0.1～1.0。

本发明提供了一种特异性检测诺如病毒的磁性纳米复合酶，由以下原料制成：特异性诺如病毒识别生物材料和所述磁性纳米酶材料AuNPs@ZnFe₂O₄@COF；

所述磁性纳米酶材料AuNPs@ZnFe₂O₄@COF的质量和特异性诺如病毒识别生物材料的摩尔比为0.005～2.5mg：0.00005～0.0003μmol。

优选的，所述特异性诺如病毒识别生物材料包括特异性诺如病毒识别肽、抗诺如病毒的抗体或诺如病毒的适配体。