[发明专利]RIG-I的半胱天冬酶激活募集结构域抗病毒多肽、载体及其在制备抗病毒药物中的应用

说明书

本发明提供了一种抗病毒多肽、载体及其在制备抗病毒药物中的应用，所述多肽为RIG‑I的半胱天冬酶激活募集结构域(2CARDs)蛋白或多肽，所述抗病毒多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明通过圆二色谱仪及核磁共振仪确定丙型肝炎病毒core RNA上存在G4结构，再利用G4pull down实验及Western Blot鉴定得到G4结构的结合蛋白RIG‑I，随后通过FRET及qRT‑PCR实验发现RIG‑I‑2CARDs结构域能稳定G4结构并抑制HCV的复制，表明2CARDs多肽可作为潜在的药物发挥抗病毒作用。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，特别涉及一种抗病毒多肽、载体及其在制备抗病毒药物中的应用。

背景技术

丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus，HCV)感染容易导致慢性肝炎，最终导致肝硬化和肝细胞癌。在全球范围内，据估计有超过1.1亿人具有当前或过去感染HCV的血清学证据，而8000万人具有慢性病毒感染，估计每年导致703800人死亡，占HCC总死亡率的三分之一。HCV属于黄病毒科单股正链RNA病毒，全长约9.6kb，其编码的多聚蛋白可被蛋白酶切割成为十个不同的蛋白，包括三个结构蛋白(核衣壳蛋白core，包膜蛋白E1和E2)和七个非结构蛋白(p7，NS2，NS3，NS4A，NS4B，NS5A，NS5B)。其中，HCV core基因编码的结构蛋白Core全长191个氨基酸，能够形成HCV病毒的核衣壳，防止病毒在感染宿主的过程中基因组RNA受到损伤。

G-四链体(G4)是由富含鸟嘌呤的DNA或RNA形成的非典型的核酸二级结构[7,8]，其基本序列公式为G_XN_1-7G_XN_1-7G_XN_1-7G_X，其中x≥3，N代表loop区，可由任一碱基组成。人类基因组中有超过375000个G4基序，广泛存在于启动子、端粒和癌基因(如c-Myc,c-Kit等)中，具有维持基因组稳定，调控基因转录、复制等重要生命进程的作用。G-四链体也存在于病毒基因中，通过与G-四链体结合蛋白的相互作用可介导病毒的免疫逃逸。研究发现HCV的RNA能够形成G4结构，且core G4最为保守和稳定。

由于HCV的高度变异性，HCV的防治必须依赖多条途径。而对HCV基因组RNA上高度保守结构的探索以及可结合这些结构的配体的筛选也将会为抗HCV感染提供新的思路。因此有必要开发一种新抗病毒药物。

发明内容

本发明目的是提供一种抗病毒多肽、载体及其在制备抗病毒药物中的应用。

在本发明的第一方面，提供了一种抗病毒多肽，所述抗病毒多肽为视黄酸诱导基因1的半胱天冬酶激活募集结构域(2CARDs)，所述抗病毒多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

在本发明的第二方面，提供了一种核酸分子，所述核酸分子为编码所述的抗病毒多肽的编码基因。

进一步地，所述核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。

在本发明的第三方面，提供了一种含有所述的编码基因的载体。

在本发明的第四方面，提供了一种含有所述载体的宿主菌。

进一步地，所述宿主菌为DH5α、Top10、BL21和Rosetta中的一种。

在本发明的第五方面，提供了一种含有所述载体的细胞系。

在本发明的第六方面，提供了一种所述的抗病毒多肽、所述的核酸分子或所述的载体或者所述的宿主菌或所述的细胞系在制备抗病毒药物中的应用。

进一步地，所述病毒包括含有G4结构的病毒。

在本发明的第七方面，提供了一种抗病毒的药物，所述药物的活性成分包括所述的抗病毒多肽。