[发明专利]用于快速培养肿瘤类器官的培养基、方法以及试剂盒

说明书

本发明涉及类器官培养领域，具体的，本发明涉及用于快速培养肿瘤类器官的培养基、方法以及试剂盒。本发明提供的培养肿瘤类器官的培养基能够大大缩短肿瘤类器官的培养时间。本发明提供的快速培养肿瘤类器官的试剂盒，包括培养肿瘤类器官的培养基、组织保存液、组织消化液、细胞团收集液，利用该试剂盒进行肿瘤类器官的培养，能够提高肿瘤类器官培养的成功率和存活率，并可在2‑5天快速建立类器官模型，可供后续实验测试应用。

技术领域

本发明涉及类器官培养领域，具体的，本发明涉及用于快速培养肿瘤类器官的培养基、方法以及试剂盒。

背景技术

目前，肿瘤发病率与死亡率逐年上升。2020年中国新发癌症病例457万例，癌症死亡病例300万例，肿瘤所造成的巨大经济、社会负担非常沉重。

手术、放疗、化疗、靶向治疗、免疫治疗及内分泌治疗是肿瘤治疗的主要手段。其中约70％的患者需要放化疗，但由于患者个体差异，肿瘤耐药或辐射抵抗是制约肿瘤成功治疗的重要因素。目前临床肿瘤药物整体有效率低(30％左右)，肿瘤不必要的治疗和没有效果的治疗造成巨大浪费。因此，肿瘤个性化治疗迫在眉睫。

类器官是一种在体外环境下培育而成的具备三维结构的微器官，拥有类似真实器官的复杂结构，并能部分模拟来源组织或器官的生理功能。目前，包括结直肠、前列腺、味蕾、食管、输卵管、肝脏、胰腺、胃、唾液腺和乳腺等在内的多个器官均成功在体外获得正常组织或肿瘤的类器官。

传统方法构建肿瘤类器官需从肿瘤组织提取肿瘤细胞，起始培养往往从单个细胞或小于30μm的细胞团开始，经过9-14天培养形成大于100μm符合实验要求的类器官模型。同时培养基生长因子成分及其在基质胶中扩散速率也是影响类器官生长的关键。

虽然多种肿瘤组织使用不同的方法、不同的培养条件下可在体外成功培养为类器官，目前体外构建肿瘤类器官模型并以此模型进行药物或者辐射检测则需耗时1-3月，但是临床需求窗口期也就2-3周时间。这就需要加速体外类器官构建速度以满足临床需求。

因此，开发一种能够高效、快速培养、对多种肿瘤类器官的培养具有普适性的培养基以及试剂盒具有重要的科研和商业价值。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提供快速培养肿瘤类器官的培养基、方法以及试剂盒，本发明提供的培养肿瘤类器官的培养基能够大大缩短肿瘤类器官的培养时间。本发明提供的快速培养肿瘤类器官的试剂盒，包括培养肿瘤类器官的培养基、组织保存液、组织消化液、细胞团收集液，利用该试剂盒进行肿瘤类器官的培养，能够提高肿瘤类器官培养的成功率和存活率，并可在2-5天快速建立类器官模型，可供后续实验测试应用。

为此，本发明第一方面提供了一种用于培养肿瘤类器官的培养基。根据本发明的实施例，所述培养基包括培养基组分和添加剂组分，其中，所述培养基组分中含有无菌蛋清提取液。

现有的传统方法构建肿瘤类器官需从肿瘤组织提取肿瘤细胞，起始培养往往从单个细胞或小于30μm的细胞团开始，经过9-14天培养形成大于100μm符合实验要求的类器官模型。同时培养基生长因子成分及其在基质胶中扩散速率也是影响类器官生长的关键。虽然多种肿瘤组织使用不同的方法、不同的培养条件下可在体外成功培养为类器官，目前体外构建肿瘤类器官模型并以此模型进行药物或者辐射检测则需耗时1-3月，但是临床需求窗口期也就2-3周时间。这就需要加速体外类器官构建速度以满足临床需求。发明人发现在培养肿瘤类器官的培养基中加入无菌蛋清提取液，有助于促进类器官生长，提高类器官生长速度。利用本发明提供的培养肿瘤类器官的培养基，能够培养来源于消化系统、呼吸系统、泌尿系统和生殖系统等多来样本来源的肿瘤组织。

根据本发明的实施例，在所述培养基中，所述无菌蛋清提取液的浓度为10-30％(v/v)。

根据本发明的实施例，所述无菌蛋清提取液的浓度为20-30％(v/v)。由此，能够进一步提高类器官生长速度。