[发明专利]一种检测爆炸物的光合细菌及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种检测爆炸物的光合细菌的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

（1）根据沼泽红假单胞菌的转录调控蛋白的氨基酸序列获得其编码的核苷酸序列，再查找其上游启动该编码核苷酸序列的启动子的核苷酸序列；

所述转录调控蛋白具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列；

所述启动子具有如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列或如SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列；

（2）将所述启动子的核苷酸序列与荧光报告基因分别经纯化、回收、酶切后相互连接，并转化沼泽红假单胞菌，鉴定阳性后得到工程菌株；

（3）活化所述工程菌株，得到光合细菌。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述荧光报告基因为绿色荧光蛋白编码基因gfp，其核苷酸序列如SED ID NO.5 所示。

3.权利要求1所述的制备方法制备得到的光合细菌。

4.利用权利要求3所述的光合细菌制备得到的沼泽红假单胞菌生物传感器。

5.权利要求4所述的沼泽红假单胞菌生物传感器在爆炸物分子检测中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述沼泽红假单胞菌生物传感器的使用方法为：将所述沼泽红假单胞菌生物传感器活化后，加入待测样品，培养2h-8h后，于激发光是485 nm、发射光是525 nm的条件下，利用酶标仪检测待测样品的荧光强度RFU值，出现荧光，说明待测样品中存在爆炸物分子，且荧光强度越强，说明待测样品中爆炸物分子的浓度越高。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述沼泽红假单胞菌生物传感器能够感应到的爆炸物分子的最低检测限浓度为0.001 mg/L -0.005 mg/L。

8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述爆炸物分子为2,4-DNT。