[发明专利]一种检测中和抗体的方法

权利要求书

1.一种检测待测样品中病原微生物中和抗体的方法，其特征在于，其包括如下步骤：

(1)将病原微生物受体结合域抗原修饰的编码磁珠与生物素标记的病原微生物受体以及待测样品进行混合、孵育，得孵育产物1；

(2)将所述孵育产物1与链霉亲和素-荧光染料混合、孵育，得孵育产物2；

(3)清洗所述孵育产物2并进行荧光强度分析、根据标准曲线计算待测样品中中和抗体的浓度。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述生物素标记的病原微生物受体的使用浓度为0.1μg/mL～100μg/mL；

和/或，步骤(1)中所述孵育的时间为1min～60min，优选20min；

和/或，步骤(1)中所述病原微生物受体结合域抗原为新冠受体结合域。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述链霉亲和素-荧光染料的用量依据步骤(1)中所述生物素标记的病原微生物受体的用量而定，所述生物素标记的病原微生物受体和所述链霉亲和素-荧光染料的质量比优选5:6；

和/或，步骤(2)中所述孵育的时间为20min；

和/或，步骤(3)进一步包括：明场拍照，得到每种磁珠的编码信息，然后和荧光照片信息合并，得到不同样本或待测物的中和抗体信息。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述荧光染料为异硫氰酸荧光素或者AlexaFluor系列染料；

和/或，所述编码磁珠为数字编码磁珠、荧光编码磁珠、条形码编码磁珠或者结构编码磁珠；较佳地，所述数字编码磁珠具有多种编码图案，每种图案标记一种样本或一种中和抗体。

5.如权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，步骤(1)中先将所述生物素标记的病原微生物受体与所述待测样品孵育1min-60min后，再与病原微生物受体结合域抗原修饰的编码磁珠进行混合、孵育。

6.如权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述病原微生物受体结合域抗原修饰的编码磁珠的制备包括如下步骤：

a).使用反应物NHS/EDC处理编码磁珠；较佳地，所述NHS和所述EDC的用量摩尔比为1:10～10:1，两者浓度优选分别为5～500mg/mL，更优选均为20mg/mL；

b).加入病原微生物受体结合域抗原、孵育，得抗原修饰的编码磁珠。

7.如权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，步骤a)中所述处理的时间为10～60min，优选30min；

和/或，步骤b)中所述孵育的时间为14-22小时。

8.如权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述标准曲线的建立包括如下步骤：

1)将病原微生物受体结合域抗原修饰的编码磁珠与生物素标记的病原微生物受体以及一系列浓度梯度的待检测中和抗体进行混合、孵育，得孵育产物1；

2)将所述孵育产物1与链霉亲和素-荧光染料混合、孵育，得孵育产物2。

9.如权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，所述病原微生物为新型冠状病毒，所述病原微生物受体为血管紧张素转化酶2。

10.编码磁珠在竞争法检测抗体中的应用；所述编码磁珠优选数字编码磁珠、荧光编码磁珠、条形码编码或者结构编码磁珠；

较佳地，所述数字编码磁珠具有多种编码图案，每种图案标记一种样本或一种中和抗体。