[发明专利]一种大肠杆菌浓度检测方法及其系统

说明书

本发明公开了一种大肠杆菌浓度检测方法及其系统，包括以下步骤：比色标准组溶液配置步骤：将多组大肠杆菌悬浮液分别与第一L‑Trp溶液混合，形成多组第一标准混合溶液；将多组第一标准混合溶液放置在黑暗环境下，并以第一预设转速、第一预设温度下振荡培养至第一预设时间后，分别加入第一对二甲氨基苯甲醛溶液形成多组第二标准混合溶液，根据第二预设时间进行振荡得到比色标准组溶液；待测样品预处理步骤：将待测样品原溶液分别与第二L‑Trp溶液混合形成第一原混合溶液；结合第二对二甲氨基苯甲醛溶液处理第一待测混合溶液；比色步骤：通过比色得到大肠杆菌预测浓度值。本发明提出的大肠杆菌浓度检测方法通过定量比色分析酶底物达到更准确的检测效果。

技术领域

本发明涉及光学传感检测领域，具体涉及一种大肠杆菌浓度检测方法及其系统。

背景技术

致病菌可引起传染病和食物中毒，严重威胁人类生命安全，已成为当今世界面临的重大 挑战。根据世界卫生组织的数据，与细菌有关的疾病每年造成约170万人死亡。其中，大肠 杆菌是最危险的致病菌之一，通过污染食物和水，可以诱发出血性腹泻、溶血性尿毒症和其 他严重疾病，甚至导致死亡。因此迫切需要建立一种快速、简单、经济、灵敏的大肠杆菌浓 度检测方法。

目前致病菌检测方法主要包括培养技术、基于聚合酶链式反应(PCR)和免疫学的分子检 测方法，但这些方法存在着操作复杂、仪器昂贵、假阳性高等局限性。因此，研究一种简单、 快速、灵敏、高选择性的检测方法对致病菌进行监控具有十分重要的现实意义。

发明内容

为了克服现有技术存在的缺陷与不足，本发明的第一目的在于提出了一种大肠杆菌浓度 检测方法，该方法通过定量比色分析酶底物以达到更准确的检测效果。

本发明的第二目的在于一种大肠杆菌浓度检测系统。

本发明的第三目的在于一种定量比色分析装置。

为了达到上述第一目的，本发明采用以下技术方案：

一种大肠杆菌浓度检测方法，包括以下步骤：

比色标准组溶液配置步骤：将多组大肠杆菌悬浮液分别与第一L-Trp溶液混合，形成多 组第一标准混合溶液；

所述多组大肠杆菌悬浮液分别为基于Tris-HCl缓冲体系的不同浓度的大肠杆菌配置溶 液，所述多组大肠杆菌悬浮液采用Tris-HCl缓冲液，pH值为9.0，浓度为20mM，第一L-Trp 溶液的浓度采用40μg/mL；

将多组第一标准混合溶液放置在黑暗环境下，并在第一预设转速、第一预设温度下振荡 培养至第一预设时间后，分别加入第一对二甲氨基苯甲醛溶液形成多组第二标准混合溶液， 根据第二预设时间进行振荡得到比色标准组溶液，所述第一对二甲氨基苯甲醛溶液的浓度为 10mg/mL，第一对二甲氨基苯甲醛溶液中的稀盐酸比例为10％；

待测样品预处理步骤：将待测样品原溶液分别与第二L-Trp溶液混合形成第一原混合溶 液，所述第二L-Trp溶液与第一L-Trp溶液相同；

将第一待测混合溶液放置在黑暗环境下，并在第二预设转速、第二预设温度下振荡培养 至第一预设时间后，加入第二对二甲氨基苯甲醛溶液中形成第二原混合溶液，根据第二预设 时间进行振荡得到待测溶液，所述第二对二甲氨基苯甲醛溶液与第一对二甲氨基苯甲醛溶液 相同；

所述第一预设转速设置为180～200rpm/min，所述第二预设转速与第一预设转速相同， 所述第一预设温度设置为37～45℃，所述第二预设温度与第一预设温度相同，所述第一预设 时间设置为1～1.5h，所述第二预设时间设置为2～3min；

比色步骤：将待测溶液分别与比色标准组溶液进行比色得到大肠杆菌预测浓度值。