[发明专利]AAV蛋白外壳的检测方法

权利要求书

1.AAV蛋白外壳的检测方法，包括：

1)将抗体与固相载体联结，形成固相抗体；

2)加入抗原，使所述抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物；

3)加入生物素化的抗体，使所述生物素化的抗体与固相抗原抗体复合物上的抗原结合，形成夹心；

4)加入结合至酶的标记探针，使所述标记探针与生物素化的抗体结合；

5)加入底物显色，其中底物在酶的催化下发生颜色变化；

6)根据底物的颜色变化，确定待测抗原的浓度；

其中，所述抗体包含重链可变区的VH CDR1-3和轻链可变区的VL CDR1-3，所述VHCDR1、VH CDR2和VH CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示，所述VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQID NO：6所示。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述AAV蛋白外壳的氨基酸序列如SEQ IDNO：9所示。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述抗体以小于1.0E-12M的K_D结合所述AAV蛋白衣壳。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其中，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：7所示，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：8所示。

5.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其中，所述抗体为嵌合抗体、人源化抗体或全人源抗体。

6.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其中，所述检测方法为定性检测方法或定量检测方法。

7.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其中，所述检测方法为定量检测方法。

8.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其中，所述标记探针为生物素或亲和素化标记探针。

9.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其中，所述酶为辣根过氧化物酶。

10.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其中，所述底物为3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)或二氨基联苯胺(DAB)。

11.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其中，所述固相载体选自：聚氯乙烯、聚苯乙烯、尼龙、聚丙烯、聚丙烯酰胺和纤维素。

12.试剂盒，其包括：

抗体，所述抗体包含重链可变区的VH CDR1-3和轻链可变区的VL CDR1-3，所述VHCDR1、VH CDR2和VH CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示，所述VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQID NO：6所示；

生物素化的所述抗体；

可选的标记探针，所述标记探针结合至酶；以及，

可选的显色底物，所述显色底物能够与所述酶发生反应。

13.根据权利要求12所述的试剂盒，其中，所述标记探针为生物素或亲和素化标记探针。

14.根据权利要求12所述的试剂盒，其中，所述酶为辣根过氧化物酶。

15.根据权利要求12至14中任一项所述的试剂盒，其中，所述底物为3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)或二氨基联苯胺(DAB)。