[发明专利]基于量子点标记的多种白介素联合检测试剂盒及检测方法在审
申请号: | 202110971259.0 | 申请日: | 2021-08-24 |
公开(公告)号: | CN113419071A | 公开(公告)日: | 2021-09-21 |
发明(设计)人: | 冯坤瑞;陈秀发;赵转;向阳 | 申请(专利权)人: | 苏州立禾生物医学工程有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/58;G01N33/577;G01N33/543 |
代理公司: | 苏州谨和知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32295 | 代理人: | 许冬莹 |
地址: | 215000 江苏省苏州市工业园*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 量子 标记 多种 白介素 联合 检测 试剂盒 方法 | ||
本发明涉及一种基于量子点标记的多种白介素联合检测试剂盒及检测方法属于医学检验测定技术领域。本发明的试剂盒主要包括样品处理液、标记有量子点的白介素抗体、包被有白介素抗体的磁性微球、浓缩洗涤剂以及反应管;白介素抗体包括白介素1β、白介素2R、白介素4等多种白介素的对应抗体。本试剂盒可一次检测出多种白介素的含量,为临床检验节省大量时间;且一次检测所需生物样本量极少,可极大减少每种白介素单独检测抽取样本的数量,减少医疗检测的花费。本品采用免疫学检测方法,结合量子点标记技术,具有较高的灵敏度、特异性和稳定性,与其他检测方法检验结果相符合。
技术领域
本发明涉及一种基于量子点标记的多种白介素联合检测试剂盒及检测方法,属于医学检验测定技术领域。
背景技术
白介素即白细胞介素,是由多种细胞产生并介导白细胞间相互作用的一类细胞因子,可调节白细胞的生长和分化,在机体免疫应答过程中起着十分重要的作用。当发生炎症反应或免疫应答时,体内白细胞介素含量常升高。
目前白介素最主要的检测方法为酶联免疫检测技术(ELISA)和流式细胞术,但ELISA法中酶标记物不稳定,酶标记物易受环境如温度、pH值等影响,且ELISA方法检测灵敏度较低,线性范围较窄,检测过程耗时长,方法重复性差,并且通常只适用手工操作,不利于全自动检测仪器的检测;而流式细胞术检测的重复性和灵敏度均较低,需要提高。此外,在医学上检测样品中白介素含量时,通常对每种白介素的含量进行单独检测,而当样品中白介素含量处于正常水平时,对每种白介素进行单独检测,既会花费大量的时间和资金,同时也是对医疗资源的一种浪费。
发明内容
本发明的一个目的在于提供一种基于量子点标记的多种白介素联合检测试剂盒及其检测方法,可通过本品一次性对生物样品中含有的各种白介素的含量进行检测。
为达到上述目的,本发明提供如下技术方案:一种基于量子点标记的多种白介素联合检测试剂盒,包括样品处理液、标记有量子点的白介素抗体、包被有白介素抗体的磁性微球、浓缩洗涤剂以及反应管;
其中,所述标记有量子点的白介素抗体中的白介素抗体和所述包被有白介素抗体的磁性微球中的白介素抗体分别对应同一白介素上两种不同的抗原表位,所述白介素抗体包括白介素1β、白介素2R、白介素4、白介素5、白介素6、白介素8、白介素10、白介素17和白介素12P70的对应抗体中的多种;对不同种类的白介素抗体选择不同发射波长的量子点进行标记,通过不同量子点发射波长及对应的荧光强度得到样品中所含白介素种类及浓度。
进一步地,所述标记有量子点的白介素抗体中标记的量子点为表面经化学基团修饰的水溶性量子点,所述水溶性量子点为CdSe/ZnS量子点或InP/ZnS量子点,所述化学基团为氨基或羧基。
进一步地,所述表面经化学基团修饰的水溶性量子点的发射光波长范围为350nm-700nm。
进一步地,所述白介素抗体可以为单克隆抗体和/或多克隆抗体。
进一步地,所述包被有白介素抗体的磁性微球,包被方式为磁性微球直接与所述白介素抗体进行偶联,或先将磁性微球与链霉亲和素偶联,然后用生物素对所述白介素抗体进行标记,再形成白介素抗体—生物素—链霉亲和素—磁性微球。
进一步地,所述基于量子点标记的多种白介素联合检测试剂盒还包括校准品。
进一步地,所述浓缩洗涤剂为30倍-50倍浓缩洗涤剂。
本发明还提供一种基于量子点标记的多种白介素联合检测方法,包括以下步骤:
S1、提供生物样品或校准品、如上所述的基于量子点标记的多种白介素联合检测试剂盒;
S2、每一种包被有白介素抗体的磁性微球和标记有量子点的白介素抗体分别使用缓冲溶液稀释成0.25-2mg/L的溶液;
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