[发明专利]一种可视化研究植物和线虫相互作用关系的试剂盒及方法和应用有效
申请号: | 202111081266.X | 申请日: | 2021-09-15 |
公开(公告)号: | CN113785765B | 公开(公告)日: | 2022-11-04 |
发明(设计)人: | 田永强;剌世凯;高丽红;李佳璠;张旭;李红;李欣;宋梦圆 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | A01G31/02 | 分类号: | A01G31/02;A01G24/10;A01G24/22;A01K67/033 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 100193 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 可视化 研究 植物 线虫 相互作用 关系 试剂盒 方法 应用 | ||
1.一种可视化研究植物和线虫相互作用关系的方法,其特征在于,包括以下步骤:
将长出胚根的种子置于含培养基的装置中进行培养,胚根朝下放置,装置中含培养基的部分进行遮光处理;
培养至根系明显伸展后,在培养基中接种线虫,接种60~72h后,进行可视化观察;
所述装置为透明的植物培养装置,所述培养基包括含质量百分含量为0.6%~0.8%琼脂的植物营养培养基;
所述植物为黄瓜;
所述长出胚根的种子的胚根长度为0.8~1.0cm;
所述根系明显伸展为根系的长度为4~5cm;
所述植物营养培养基还包括除琼脂以外的硝酸钙800~950mg/L、硫酸钾550~600mg/L、磷酸二氢铵90~100mg/L和硫酸镁450~493mg/L,pH调为6.8~7.2。
2.根据权利要求1所述的可视化研究植物和线虫相互作用关系的方法,其特征在于,所述装置包括平底透明玻璃管;所述装置的形状包括圆柱形。
3.根据权利要求2所述的可视化研究植物和线虫相互作用关系的方法,其特征在于,所述装置还包括用于遮光的管罩。
4.根据权利要求1所述的可视化研究植物和线虫相互作用关系的方法,其特征在于,所述线虫在接种前,进行无菌培养;所述无菌培养的方法包括以下步骤:
从感染线虫的植物的根系上挑取线虫的卵块,将所述卵块浸泡于质量百分含量为0.6%~0.8%的次氯酸钠水溶液中进行震荡,震荡后过600目网筛,网筛上的卵块用无菌水冲洗,然后用含有1.0~1.5mg/ml庆大霉素和0.04~0.05mg/ml制霉菌素的水溶液将卵块冲洗至培养皿内,黑暗条件下孵化4~5天,得到含有线虫二龄幼虫的孵化液,将含有线虫二龄幼虫的孵化液过孔径为40μm的滤网,得到的滤液即为无菌的线虫悬浮液。
5.根据权利要求1或4所述的可视化研究植物和线虫相互作用关系的方法,其特征在于,所述线虫包括根结线虫。
6.根据权利要求1所述的可视化研究植物和线虫相互作用关系的方法,其特征在于,所述可视化观察包括直接肉眼观察根结和/或通过酸性品红染色法观察线虫的侵染情况。
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