[发明专利]一种可视化研究植物和线虫相互作用关系的试剂盒及方法和应用

说明书

本发明涉及一种可视化研究植物和线虫相互作用关系的试剂盒及方法和应用，属于植物病害防治技术领域。本发明提供了含质量百分含量为0.6％～0.8％琼脂的植物营养培养基在制备可视化研究植物和线虫互相作用关系的试剂盒中的应用。含质量百分含量为0.6％～0.8％琼脂的植物营养培养基，后续结合本发明透明的植物培养装置既能提供植物正常生长所需要的基本营养元素，又能模拟线虫在土壤中迁移的特性，保证植物寄生线虫在凝胶内的易迁移和可侵染根系，实现对线虫侵染量的统计和可视化，并实现根结的形成和计数的统计，大大方便植物和线虫相互作用的相关研究。

技术领域

本发明涉及植物病害防治技术领域，具体涉及一种可视化研究植物和线虫相互作用关系的试剂盒及方法和应用。

背景技术

植物寄生线虫是我国乃至全世界范围内引起农作物病害的重要病原物之一，一般可造成减产10％～30％，有时甚至颗粒无收，每年造成的农业损失已高达数百亿。我国尤其以胞囊线虫和根结线虫危害面积最广，受害程度最大，对于园艺作物，尤其是蔬菜来说，以根结线虫为主，此种根结线虫主为专性活体营养寄生型线虫，只能在活的寄主植物组织和细胞内进行寄生取食，且无法体外培养。这种类型的病原线虫主要通过自身的口针分泌的分泌物来诱导植物细胞进行非正常分化，形成线虫自身的专化性的取食位点，并形成巨细胞，引起植物自身生长紊乱，阻断地上部和地下部物质的运输和信息交流，严重影响植物自身的生长和发育。

根结线虫病害由来已久，目前根结线虫的防治主要采用化学药剂防治(如棉隆和威百亩)和物理防治(如高温闷棚和大水漫灌)的方法。但是，化学药剂本身具有环境污染性和人体毒害性，长期施用不仅会提高线虫自身的抗性而降低药剂药效，而且容易对非靶目标(如无害土壤微生物和动物)造成毒害。此外，物理防治不仅会破坏土壤理化性状(如破坏土壤团聚体结构、造成养分失衡)，而且对有益微生物群落和作物生长不利。近年来也逐渐加大通过生物措施抑制土壤中根结线虫的繁殖和阻控作物根结线虫病害的发生，如利用生防菌防治根结线虫的方式。

截至目前，仍无切实有效、环境友好的措施来降低根结线虫病害的发生，其中最主要的一个原因是影响根结线虫侵染植物根系的因素非常之多，根结线虫本身作为一种低等生物，在长期的进化过程中，已经形成完整的侵染方式和寄生机制，给相关领域的研究者带来很大的研究挑战。

根结线虫二龄幼虫J2的侵染量或侵染率往往是防治病害的一个关键指标，同时，在生防菌防治根结线虫的研究中，如何能够在短时间内筛选有效的生防菌，验证其对根结线虫的侵染量的影响，在该领域也是及其需要突破的。因此，在实验室条件下如何能够最大程度的简化试验因素，研究根结线虫和根系的互作成为了该领域的一个关键点；如何能够简化试验条件，精确对根结线虫的侵染量进行统计和可视化，以及对后期根结的可视化是研究者的难点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种可视化研究植物和线虫相互作用关系的试剂盒及方法和应用。含质量百分含量为0.6％～0.8％琼脂的植物营养培养基能够提供植物正常生长所需要的基本营养元素，又能模拟线虫在土壤中迁移的特性，保证植物寄生线虫在凝胶内的易迁移和可侵染根系，实现对线虫侵染量的统计和可视化，并实现根结的形成和计数的统计，大大方便植物和线虫相互作用的相关研究。

本发明提供了含质量百分含量为0.6％～0.8％琼脂的植物营养培养基在制备可视化研究植物和线虫互相作用关系的试剂盒中的应用。

本发明还提供了一种可视化研究植物和线虫相互作用关系的试剂盒，所述试剂盒包括可视化研究植物和线虫相互作用关系的装置和培养基；所述装置为透明的植物培养装置，所述培养基包括含质量百分含量为0.6％～0.8％琼脂的植物营养培养基。

优选的是，所述植物营养培养基还包括除琼脂以外的硝酸钙800～950mg/L、硫酸钾550～600mg/L、磷酸二氢铵90～100mg/L和硫酸镁450～493mg/L，pH调为6.8～7.2。

优选的是，所述装置包括平底透明玻璃管；所述装置的形状包括圆柱形。