[发明专利]靶向刺突蛋白HR1的订书肽、制备方法及抗新型冠状病毒应用

权利要求书

1.一种靶向刺突蛋白HR1的订书肽，其特征在于：以SEQ ID NO.1所示的直链肽Ac-DISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL-NH₂为肽链模板，将第20位以及第24位氨基酸被2-氨基-2-甲基-6-庚烯酸替换并环合得到。

2.权利要求1所述的靶向刺突蛋白HR1的订书肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

A、在缩合剂作用下使首个氨基酸的C端与固相载体偶联；

B、使用脱保护试剂脱去氨基酸上的Fmoc保护基；

C、在缩合剂作用下连接下一个氨基酸；

D、重复进行脱保护-耦合操作，依照氨基酸序列合成肽链；其中，以S5分别替代第20和第24位氨基酸；

E、最后一个氨基酸脱保护后乙酰化；

F、在环合剂作用下使第20和第24位的S5氨基酸发生烯烃复分解反应，环合肽链；

G、使用切割试剂将肽链从载体上切下，纯化后得相应订书肽。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

其中，步骤A中，缩合剂为DIC-肟基氰乙酸乙酯缩合体系，以N-甲基吡咯烷酮为溶剂；氨基酸、肟基氰乙酸乙酯、DIC的摩尔比为1:1:1:6～1:0.9:0.9:6；固相载体的载样量为0.3mmol/g；偶联反应过程中，反应温度为50～60℃，偶联反应时间为20-30min，

步骤B中，所述脱保护试剂为肟基氰乙酸乙酯、哌啶及DMF的混合溶液，肟基氰乙酸乙酯的质量与哌啶及DMF体积的比例为71:2:4；

脱Fmoc保护基的操作条件如下：采用脱保护试剂连续两次作用5min，反应温度为20～30℃。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

其中，步骤D中，连接S5后所接的第一个氨基酸反应时间为2h，并按相同条件重复反应一次后再进行下一步操作；

步骤E中，使用的乙酰化试剂为DIEA、醋酸酐与DMF的混合液，投料体积比为1:1:8；采用固相载体在乙酰化试剂中反应20min，反应温度为20～30℃。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

其中，步骤F中，环合剂为GrubbsⅠ试剂的二氯乙烷的溶液，固相载体量:GrubbsⅠ试剂:二氯乙烷＝0.3mmol:58mg:6mL；环合时，将固相载体在环合试剂中震荡两次，每次2h，反应温度为20～30℃，

步骤G中，切割试剂为TIPS、TFA、H₂O和苯酚的混合溶液，体积比为2:88:5:5，所述切割试剂与直链肽的体积质量比为1:10mL/mg，切割的温度为20～30℃，切割的时间为4h。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

其中，步骤G中，采用的纯化方法为反向高效液相色谱法，条件如下：色谱柱：YMC-PackODS-AQ柱；流动相：流动相A为0.1％TFA/水，流动相B为0.1％TFA/乙腈；梯度洗脱程序：39％B洗脱0～5min，39％～59％B洗脱5～60min；流速为20mL/min，进样量为5mL，检测波长214nm。

7.权利要求1所述的靶向刺突蛋白HR1的订书肽在制备抗病毒药物中的用途，所述抗病毒药物为抗SARS-CoV-2病毒的药物。

8.一种抗病毒药物组合物，其特征在于，包括活性组分以及药学上可接受的辅料，所述活性组分以权利要求1所述的靶向刺突蛋白HR1的订书肽为唯一活性组分。

9.一种抗病毒药物组合物，其特征在于，包括活性组分以及药学上可接受的辅料，所述活性组分包含权利要求1所述的靶向刺突蛋白HR1的订书肽。