[发明专利]靶向刺突蛋白HR1的订书肽、制备方法及抗新型冠状病毒应用

说明书

本发明公开了靶向刺突蛋白HR1的订书肽、制备方法及抗新型冠状病毒应用，以SEQ ID NO.1所示的直链肽Ac‑DISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL‑NHsubgt;2/subgt;为肽链模板，将第i位以及第i+4位氨基酸被2‑氨基‑2‑甲基‑6‑庚烯酸替换并环合得到，其中，i为1～32中的任意整数。本发明通过对covHR2‑0进行修饰，合成一系列订书肽，增强其螺旋度和稳定性，从而表现出对新冠病毒更有效的融合抑制活性，实验结果证实了其可显著抑制新型冠状病毒的生长和繁殖，在预防和治疗新型冠状病毒方面具有潜在应用价值。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种多肽药物，具体涉及一种靶向刺突蛋白HR1的订书肽、制备方法及应用。

背景技术

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是指由一种传染性强、致病性强的冠状病毒SARS-CoV-2感染导致的肺炎疾病，感染后常见伴有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。从2019年起就对全世界的经济和社会造成了不可估量的损失，感染人数和因其导致的死亡人数，使公共卫生面临前所未有的压力，也对全球公共安全构成重大威胁。尤其最近局部地区的疫情反弹，至今人们还生活在恐慌和不安中，因此全球开发针对新冠的疗法的研发工作的十分重要，研发新型抗冠状病毒药物刻不容缓。

正如我们所知，开发SARS-CoV-2疫苗是一种方法。尽管针对新型冠状病毒的疫苗已经研发出来了。目前的疫苗只能用于在没有感染的情况下防止SARS-CoV-2感染，一旦患者被感染，不能用做治疗药物。治疗2019冠状病毒病有效药物的市场还相对空缺。另外，相对来说，接种疫苗后，感染SARS-CoV-2也不是绝对不可能的，目前有些感染者中就已经全程接种了疫苗。多肽分子具有亲和力高、选择性好、毒性低的优点，在抗病毒药物的开发中也发挥着重要作用，去寻找抑制SARS-CoV-2感染的多肽药也是一个手段。

SARS-CoV-2Spike蛋白首先通过与hACE2受体结合而侵入细胞，然后在宿主细胞中复制。SARS-CoV-2Spike蛋白由S1亚基和S2亚基组成。S1亚基与细胞受体结合，诱导S2亚基的构象变化；然后，S2亚基中的HR1区域与HR2区域结合，促进SARS-CoV-2融合和进入。宿主细胞与SARS-CoV-2之间的蛋白-蛋白相互作用(Protein-protein interaction,PPI)是抑制SARS-CoV-2复制的重要靶点。因此，寻找抑制SARS-CoV-2与细胞受体结合的肽融合抑制剂是一项重要的策略和挑战。

现有技术披露的众多信息中到，有文献报道36个氨基酸残基的covHR2-0直连肽可以通过与新型冠状病毒的S蛋白HR1区域结合，从而抑制病毒与受体细胞结合(Xia,S.,etal.,Fusion mechanism of 2019-nCoV and fusion inhibitors targeting HR1 domainin spike protein.Cell Mol Immunol,2020.17(7):p.765-767)。尽管多肽有高结合力、低毒性等优势，但也存在一定缺陷，直链肽的透膜能力较差，它在生理环境下多肽稳定性也较差，容易被降解，导致它们失去相关的生物构象，结合选择性低。

在直链肽的基础上适当优化可得到活性更好，稳定性更高的多肽药物。订书肽是近年来获得广泛关注的一类稳定性强、透膜性好的多肽模拟物，利用订书肽策略能够有效地提高多肽的螺旋性、稳定性。因此，本申请发明人推测将covHR2-0进行修饰，设计合成一系列的订书肽，有助于提高它的稳定性，螺旋度和抗病毒活性。实验结果也表明一些covHR2-0的订书肽的研究有一定的意义，可能是未来抗新型冠状病毒药物开发优良的先导化合物。

发明内容

本发明依托上述研究进行，针对目前新型冠状病毒药物治疗缺乏的现状，提供一种具有抑制新型冠状病毒生长繁殖的订书肽及其制备方法和应用。为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：