[发明专利]一种用于检测鸡滑液囊支原体的扩增引物、试剂盒及应用在审
申请号: | 202111197914.8 | 申请日: | 2021-10-14 |
公开(公告)号: | CN113789398A | 公开(公告)日: | 2021-12-14 |
发明(设计)人: | 卞红春;余树培;夏文龙;杨凌;韩昆鹏;陈静华;陈丽珠;吴婷婷 | 申请(专利权)人: | 盐城市畜牧兽医站(盐城市动物疫病预防控制中心) |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 崔瑞迎 |
地址: | 224002 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 鸡滑液囊 支原体 扩增 引物 试剂盒 应用 | ||
1.一种用于检测鸡滑液囊支原体的扩增引物,其特征在于,包括上游引物和下游引物,所述上游引物和下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1-2所示。
2.一种用于检测鸡滑液囊支原体的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的扩增引物。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括A buffer、B buffer和ddH2O。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括阳性对照品和阴性对照品。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述阳性对照品为鸡滑液囊支原体基因组DNA;所述阴性对照品为ddH2O。
6.权利要求1所述扩增引物在非诊断目的检测鸡滑液囊支原体中的应用,其特征在于,所述应用包括以下步骤:
S1、提取待测样品的基因组DNA;
S2、以待测样品的基因组DNA为模板,利用权利要求1所述引物,进行等温扩增;
S3、将扩增产物纯化后,进行琼脂糖凝胶电泳检测;
若扩增出长度为162bp的特异性片段,检测结果为鸡滑液囊支原体阳性;若未扩增出长度为162bp的特异性片段,检测结果为鸡滑液囊支原体阴性。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,S2中,反应体系以50μL计包括:A buffer29.4μL,10μM的上游引物2μL,10μM的下游引物2μL,模板1μL,ddH2O 13.1μL,B buffer 2.5μL。
8.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,S2中的反应程序为26-42℃,30min。
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