[发明专利]中药半边莲指纹图谱的检测方法

权利要求书

1.一种中药半边莲指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、中药半边莲供试品溶液的制备：

取不同批次的中药半边莲，分别精密称取中药半边莲样品，置锥形瓶中，加甲醇，超声处理，过滤，滤液蒸干，用甲醇复溶，过微孔滤膜，得供试品溶液；

步骤2、对照品溶液的制备：

精密称定槲皮苷、木樨草素、蒙花苷、芹菜素、香叶木素对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成对照品溶液；

步骤3、精密吸取步骤2的对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录标准品色谱图；

步骤4，分别精密吸取步骤1的各批次供试品溶液，注入高效液相色谱仪，记录样品色谱图；

步骤5，将步骤4中获得的中药半边莲供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A；选择不同批次中药半边莲供试品的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成中药半边莲的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间，标注对照指纹图谱中峰的化学成分。

2.根据权利要求1所述的中药半边莲指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤1中药半边莲供试品溶液制备方法为：取11批次的中药半边莲，精密称取中药半边莲样品1～5g置锥形瓶中，加甲醇50mL，超声处理0.5～1h，过滤，滤液蒸干，用甲醇复溶，定容至5mL，过0.22μm微孔滤膜，得供试品溶液。

3.根据权利要求1所述的中药半边莲指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤2混合对照品溶液的制备：精密称定槲皮苷、木樨草素、芹菜素、香叶木素对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成浓度为503.50μg/mL的槲皮苷、20.15μg/mL的木犀草素、10.0394μg/mL的芹菜素、25.46μg/mL香叶木素混合对照品溶液；精密称定蒙花苷，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成浓度为156.31μg/mL的蒙花苷对照品溶液。

4.根据权利要求1所述的中药半边莲指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤3、步骤4中，液相色谱条件为：色谱柱：YMC-Pack ODS-A，流动相：甲醇为A相，水为B相，紫外检测器，检测波长：330nm，柱温40℃，流速1.0mL/min，进样体积：20μL，梯度洗脱程序如下：

程序	时间/min	甲醇浓度/％	水浓度/％
1	0.01	30	70
2	5.00	30	70
3	15.00	35	65
4	20.00	40	60
5	30.00	42.5	57.5
6	35.00	46	54
7	45.00	48	52
8	55.00	48	52
9	60.00	100	0

。

5.根据权利要求1所述的中药半边莲指纹图谱的检测方法，其特征在于，指纹谱图中共有峰11个；其中槲皮苷保留时间为27.905min，为4号峰；木樨草素的保留时间为42.060min，为6号峰；蒙花苷的保留时间为43.628min，为7号峰；芹菜苷的保留时间为51.790min，为9号峰；香叶木素的保留时间为54.699min，为11号峰。