[发明专利]一种重组大肠杆菌及其构建方法和应用在审
申请号: | 202111485206.4 | 申请日: | 2021-12-07 |
公开(公告)号: | CN114395518A | 公开(公告)日: | 2022-04-26 |
发明(设计)人: | 章文明;姜岷;陶雨萱;信丰学;王含笑;蒋羽佳 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/52;C12N15/61;C12N15/70;C12N15/66;C12P7/46;C12R1/19 |
代理公司: | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人: | 肖明芳 |
地址: | 211800 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 重组 大肠杆菌 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种重组大肠杆菌,其特征在于,其导入了表达来自谷氨酸棒杆菌的氧化应激调节酶的基因
2.权利要求1所述的重组大肠杆菌的构建方法,其特征在于,通过将表达来自谷氨酸棒杆菌的氧化应激调节酶的基因
3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)目的基因片段
(2)使用一步克隆法将目的基因片段克隆至出发质粒上,得到重组质粒;
(3)将测序正确的阳性克隆质粒转化入宿主菌大肠埃希氏菌(
4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述出发质粒为pTrc99A质粒。
5.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,步骤(2)中,设计携带酶切位点 HindⅢ以及载体 pTrc99A 同源臂的引物,插入线性化的基因片段
6.权利要求1或权利要求5所述的重组大肠杆菌在制备丁二酸中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述重组大肠杆菌降低发酵法生产丁二酸中高浓度底物和高浓度产物的抑制作用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述重组大肠杆菌可在底物含有90 g/L的葡萄糖或产物中含有30 g/L的丁二酸钠和60 g/L的葡萄糖为碳源的发酵体系中发酵生产丁二酸。
9.一种提高大肠杆菌抗逆性和产物合成性能的方法,其特征在于,通过将表达来自谷氨酸棒杆菌的氧化应激调节酶的基因
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述大肠杆菌的保藏号为CCTCCNO:M2012351的大肠埃希氏菌(
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