[发明专利]一种永久性玻片标本制作方法

说明书

本发明属于玻片标本制作领域，尤其是一种永久性玻片标本制作方法，针对现有的永久玻片标本制作时,难以确定最佳的制作方法的问题，现提出如下方案，其包括以下步骤：S1：取真菌菌丝、孢子或芽生孢子制作样本；S2：将处理好的样本放入离心机，离心处理；S3：弃掉上清液，取沉淀物制作孢子悬浮液；S4：在载玻片上滴加染色液后，放入悬浮孢子，放盖玻片后，使用中性树脂对盖玻片边缘进行密封，并标号；S5：将标号的玻片放入烘箱烘干；S6：对烘干后的玻片进行观察,计算合格率，本发明通过对多批次的永久玻片标本计算统计合格率,从而方便确定最佳永久玻片标本的制作方法。

技术领域

本发明涉及玻片标本制作技术领域，尤其涉及一种永久性玻片标本制作方法。

背景技术

植物病原菌玻片标本是植物病理学实验教学中重要的实验材料。植物病原菌玻片标本分永久玻片标本和半永久玻片标本等。永久玻片标本可以永久保存，永久使用。半永久玻片标本保存期短，使用年限3年左右。关于永久玻片标本的制作方法，在专著(植病研究方法)及教科书(实验指导书)中只介绍了和寄主组织在一起的病原菌结构，如：带有寄主组织的子囊壳、分生孢子器、分生孢子盘等的永久玻片标本制作方法，而对于离体的粉状孢子类如何将其制作成永久玻片标本未见有介绍，其它科技文献中也未见有报道。因此长期以来，对离体的粉状孢子类，如：黑粉菌、红粉菌等，只能将其制作成半永久玻片标本，由于保存使用期短，需要不断地投入人力、物力和时间来制作这类病原菌玻片。因此，如何将离体的粉状孢子制作成永久玻片标本，是植物病原菌制片技术的一个空白点。

现有技术中，永久玻片标本制作时,难以确定最佳的制作方法,因此我们提出了一种永久性玻片标本制作方法，用来解决上述问题。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有的永久玻片标本制作时,难以确定最佳的制作方法的缺点，而提出的一种永久性玻片标本制作方法。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种永久性玻片标本制作方法，包括以下步骤：

S1：取真菌菌丝、孢子或芽生孢子制作样本；

S2：将处理好的样本放入离心机，离心处理；

S3：弃掉上清液，取沉淀物制作孢子悬浮液；

S4：在载玻片上滴加染色液后，放入悬浮孢子，放盖玻片后，使用中性树脂对盖玻片边缘进行密封，并标号；

S5：将标号的玻片放入烘箱烘干；

S6：对烘干后的玻片进行观察,计算合格率。

优选的，所述S1中，取真菌菌丝、孢子或芽生孢子放入离心管中，向离心管中加入没过孢子的处理液，静置10-30min，制作样本。

优选的，所述S2中，将处理好的样本连同离心管放入离心机中，调节转速为500-2000rpm，离心时间为10-20min。

优选的，所述S3中，将离心处理后的样本弃掉上清液，并通过0.22μm滤膜进行过滤，过滤后的沉淀物加入20％-70％树脂胶混合液，混合均匀制作孢子悬浮液。

优选的，所述S4中，取3-5个玻片，在载玻片上滴加50-150ul的染色液，并用玻璃棒蘸取一滴孢子悬浮液至染色液中，放盖玻片后轻压，使用过滤纸吸取多余染色液后，用中性树脂对盖玻片边缘进行密封，并对密封好的玻片进行标号。

优选的，所述S5中，将标号后的玻片放入烘箱，烘干后取出,预设温度为40-50℃。

优选的，所述S6中，将烘干后的永久玻片放置自然冷却至常温后,使用高倍镜观察,真菌形态和结构保存完好,染色显色正常即为合格,将同一批次中合格的永久玻片数量与同一批次的永久玻片总数对比,求出合格率。