[发明专利]濒危半红树植物莲叶桐SSR引物及其应用

权利要求书

1.莲叶桐特异性SSR引物，其特征在于，包括如下引物对：

Hn001-F和Hn001-R，核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示；

Hn002-F和Hn002-R，核苷酸序列如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示；

Hn003-F和Hn003-R，核苷酸序列如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示；

Hn004-F和Hn004-R，核苷酸序列如SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示；

Hn005-F和Hn005-R，核苷酸序列如SEQ ID No.9和SEQ ID No.10所示；

Hn006-F和Hn006-R，核苷酸序列如SEQ ID No.11和SEQ ID No.12所示；

Hn007-F和Hn007-R，核苷酸序列如SEQ ID No.13和SEQ ID No.14所示；

Hn008-F和Hn008-R，核苷酸序列如SEQ ID No.15和SEQ ID No.16所示；

Hn009-F和Hn009-R，核苷酸序列如SEQ ID No.17和SEQ ID No.18所示；

Hn010-F和Hn010-R，核苷酸序列如SEQ ID No.19和SEQ ID No.20所示；

Hn011-F和Hn01-R，核苷酸序列如SEQ ID No.21和SEQ ID No.22所示；

Hn012-F和Hn012-R，核苷酸序列如SEQ ID No.23和SEQ ID No.24所示；

Hn013-F和Hn013-R，核苷酸序列如SEQ ID No.25和SEQ ID No.26所示；

Hn014-F和Hn014-R，核苷酸序列如SEQ ID No.27和SEQ ID No.28所示；

Hn015-F和Hn015-R，核苷酸序列如SEQ ID No.29和SEQ ID No.30所示；

Hn016-F和Hn016-R，核苷酸序列如SEQ ID No.31和SEQ ID No.32所示；

Hn017-F和Hn017-R，核苷酸序列如SEQ ID No.33和SEQ ID No.34所示。

2.权利要求1所述的特异性SSR引物在莲叶桐居群遗传多样性、遗传分化分析或遗传结构分析中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于包括如下步骤：

（1）提取莲叶桐基因组DNA；

（2）利用权利要求1所述的特异性SSR引物进行荧光标记PCR扩增；

（3）检测扩增产物，获得检验结果；

（4）利用步骤（3）的结果进行莲叶桐居群遗传多样性分析、遗传分化分析或遗传结构分析。

4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，PCR扩增反应体系如下：2×Taq PCRMaster Mix 7.5 uL，Mix primer 2.0 uL，DNA template 1 uL，ddH₂O 4.5 uL，总量15 uL；PCR的扩增程序如下：96℃预变性3min，96℃变性 30s，60℃退火40s，72℃延伸1min，循环30次，最后在72℃延伸10min。

5.试剂盒，含有权利要求1所述的特异性SSR引物。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，还包括PCR扩增体系试剂。

7.权利要求5或6所述的试剂盒在莲叶桐居群遗传多样性、遗传分化分析或遗传结构分析中的应用。