[发明专利]一种丁香疫霉的特异性检测靶标Psyri_s00018g00015.1及其应用有效
申请号: | 202111517439.8 | 申请日: | 2021-12-13 |
公开(公告)号: | CN114015804B | 公开(公告)日: | 2022-07-12 |
发明(设计)人: | 戴婷婷;周紫薇;焦彬彬;俞萱;徐洁莹 | 申请(专利权)人: | 南京林业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/31;C12N15/11;C07K14/37 |
代理公司: | 镇江至睿专利代理事务所(普通合伙) 32529 | 代理人: | 刘静 |
地址: | 210018 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 丁香 特异性 检测 靶标 psyri_s00018g00015 及其 应用 | ||
1.一种丁香疫霉的特异性检测靶标Psyri_s00018g00015.1,其特征在于,所述检测靶标的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.一种检测丁香疫霉的引物和探针组合,其特征在于,所述引物包括正向引物和反向引物,所述正向引物序列如SEQ ID NO:3所示,所述反向引物序列如SEQ ID NO:4所示,所述探针序列如SEQ ID NO:5所示。
3.一种检测丁香疫霉的试剂盒,其特征在于,至少包括1次用量的含有权利要求2所述的引物和探针组合的检测溶液。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括:装有冻干酶粉的Twist Amp 反应单元管、缓冲液Buffer、MgAc、去离子水、HybriDetect assay buffer、侧流层析试纸条。
5.权利要求1所述的特异性检测靶标Psyri_s00018g00015.1、权利要求2所述的引物和探针组合以及权利要求3或4所述的试剂盒在检测丁香疫霉中的应用。
6.一种丁香疫霉的检测方法,其特征在于,
1)提取待测样本DNA;
2)以DNA为模板,利用权利要求2所述的引物和探针组合或权利要求4所述的试剂盒进行RPA扩增;
3)应用侧流层析试纸条进行RPA扩增产物检测;当试纸条出现两条棕色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明样本中含有丁香疫霉;当试纸条只有质控区出现一条棕色条带,检测区没有条带,则结果是阴性,表明样本中不含有丁香疫霉。
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