[发明专利]一种金胆粉的检测方法

说明书

本发明属于化学药物分析技术领域，公开了一种金胆粉的检测方法。该检测方法采用高效液相色谱进行检测，所述高效液相色谱的条件包括：流动相：流动相A：四氢呋喃水溶液；流动相B：三氟乙酸甲醇溶液。该检测方法可同时对牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、牛磺胆酸、牛磺‑7‑酮基胆石酸、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸等6种胆酸类物质进行检测，且具有检测准确度高、重复性好、稳定性佳等优势，能够满足实际金胆粉质量的检测需求。

技术领域

本发明属于化学药物分析技术领域，尤其涉及一种金胆粉的检测方法。

背景技术

胆酸类物质通常分为结合型胆酸物质和游离型胆酸物质两种，其中牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸为结合型胆酸物质，而熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸等为游离型胆酸物质。胆酸类物质存在着紫外吸收弱，或仅有末端吸收的特点，采用紫外检测器进行检测时需采用低波长进行检测；而在低波长端，结合型胆酸物质的响应值远比游离型胆酸物质的响应值大，且多种有机溶剂对待测组分存在干扰，并存在基线波动、噪音大、灵敏度低、线性差、准确度不高等问题。

已知熊胆粉(金胆粉)的主要成分是牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸，但在生物转化过程中，可能会引入牛磺胆酸、牛磺-7-酮基胆石酸、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸等杂质。而熊胆粉中所含有的各胆酸类物质的极性差异不一致，导致在检测过程中很难用同一个色谱系统将主成分和有关物质有效分离出来。对1996年中国药典方法以及赵勇等发表在华西药学杂志的方法进行方法重现的过程中，发现牛磺熊去氧胆酸和牛磺-7-酮基胆石酸等杂质无法分离，其检测灵敏度较低，且检测准确度较差。

因此，本发明希望提出一种新的金胆粉检测方法，可在同一色谱条件下对金胆粉中多种胆酸类物质同时进行快速和准确的检测，以实现控制产品质量的目的。

发明内容

本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种金胆粉的检测方法。该检测方法可同时对牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、牛磺胆酸、牛磺-7-酮基胆石酸、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸等6种胆酸类物质进行检测，且具有检测准确度高、重复性好、稳定性佳等优势，能够满足实际金胆粉质量的检测需求。

本发明提供了一种金胆粉的检测方法，采用高效液相色谱进行检测，所述高效液相色谱的条件包括：

流动相：流动相A：四氢呋喃水溶液；流动相B：三氟乙酸甲醇溶液。

优选的，所述四氢呋喃水溶液中四氢呋喃的质量分数为0.1-1％。更优选的，所述四氢呋喃水溶液中四氢呋喃的质量分数为0.3％。

优选的，所述三氟乙酸甲醇溶液中三氟乙酸的质量分数为0.1-1％。更优选的，所述三氟乙酸甲醇溶液中三氟乙酸的质量分数为0.2％。

优选的，所述检测方法包括以下检测步骤：

系统适应性溶液的制备：分别称取牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、牛磺胆酸、牛磺-7-酮基胆石酸、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸，用稀释剂溶解后，混合，配制成系统适应性溶液；

供试品溶液的制备：称定供试品，用稀释剂进行溶解，配制成供试品溶液；

将所述系统适应性溶液、供试品溶液和空白样品分别注入高效液相色谱仪进行检测，采用面积归一化法进行计算；其中空白样品为稀释剂。

更优选的，所述稀释剂为甲醇。

更优选的，所述供试品溶液的质量浓度为0.05-0.15mg/mL。

更优选的，所述系统适应性溶液进行检测时，理论板数≥1500，分离度≥1.5，拖尾因子≤2.0。

根据《中国药典》，分离度(简称为R)也叫分辨率，是指相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值，其计算公式为R＝2(tR2-tR1)/(W1+W2)，tR1和tR2为相邻两峰的保留时间，W1和W2为其相应的峰宽。