[发明专利]一种美丽月见草种苗的繁育方法

权利要求书

1.一种美丽月见草种苗的繁育方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)外植体的选择和处理：于当年5-6月份选取无病虫害的幼枝作为外植体，去除多余叶片及叶柄，切分成1-2cm并带有节间的茎段，洗洁精浸洗，流水冲洗，灭菌剂灭菌2次，无菌水冲洗；

(2)不定芽的诱导：将经过步骤(1)处理的外植体接种于诱导培养基中，光照培养4周，获得不定芽，培养条件为：温度(25±2)℃，光照时间12h/d，光照强度1000-1500Lx；

(3)增殖培养：将步骤(2)获得的不定芽切成1-2cm的茎段，切除多余的叶片，每个茎段带有一个节间且保留1-2片叶片，接种至增殖培养基中，培养4周，获得丛生芽，培养条件为：温度(25±2)℃，光照时间12h/d，光照强度1000-1500Lx；

(4)生根培养：将步骤(3)获得的丛生芽切分成单株，接种于生根培养基中，培养15天，获得生根苗，培养条件为：温度(25±2)℃，光照时间12h/d，光照强度1000-1500Lx；

(5)练苗、移栽：将步骤(4)获得的生根苗放在室温中预处理1周后，取出生根苗，清洗掉培养基，杀菌剂浸泡30min，种植于配制好的基质中，遮光练苗，空气湿度保持在60-70％之间，1周后置于自然光下，获得美丽月见草再生植株。

2.根据权利要求1所述的一种美丽月见草种苗的繁育方法，其特征在于，所述步骤(2)中，诱导培养基以MS培养基为基本培养基，添加6-BA浓度为0.5-2.0mg/L、NAA浓度为0.1-1.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂7.0g/L，PH为5.8-6.2。

3.根据权利要求1所述的一种美丽月见草种苗的繁育方法，其特征在于，所述步骤(3)中，增殖培养基以MS培养基为基本培养基，添加6-BA浓度为0.5-1.5mg/L、NAA浓度为0.1-1.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂7.0g/L，PH为5.8-6.2。

4.根据权利要求1所述的一种美丽月见草种苗的繁育方法，其特征在于，所述步骤(4)中，生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基，添加IAA浓度为0.3-1.0mg/L、AC浓度为1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂7.0g/L，PH为5.8-6.2。

5.根据权利要求1所述的一种美丽月见草种苗的繁育方法，其特征在于，所述步骤(1)中，选取半硬化的幼枝作为外植体，灭菌剂分别为75％酒精和10％新洁尔灭，灭菌时间分别为30s和20min。

6.根据权利要求1所述的一种美丽月见草种苗的繁育方法，其特征在于，所述步骤(2)中，将经过处理的外植体切除部分伤口垂直接种于诱导培养基上，分清植物学上下端，下端插进诱导培养基中，上端暴露在诱导培养基上。

7.根据权利要求1所述的一种美丽月见草种苗的繁育方法，其特征在于，所述步骤(3)中，进行切段的不定芽株高为3-5cm。

8.根据权利要求1所述的一种美丽月见草种苗的繁育方法，其特征在于，所述步骤(4)中，进行切分的丛生芽株高为4cm以上。

9.根据权利要求1所述的一种美丽月见草种苗的繁育方法，其特征在于，所述步骤(5)中，预处理的方法为：打开瓶盖倒入蒸馏水，再将瓶盖盖在瓶口上，不拧紧，2-3天后拿掉瓶盖，放置在温室中弱光下2-3天，20-25℃保持瓶内有充足的蒸馏水；所述基质中各组分体积比为泥炭：珍珠岩：蛭石：稻壳炭＝6：2：1.5：0.5。