[发明专利]一种基于（Z）-EDTO特征标志物鉴别九龙藤蜂蜜的方法

说明书

本发明涉及蜂蜜检测领域，具体涉及一种基于(Z)‑EDTO特征标志物鉴别九龙藤蜂蜜的方法，分析对比不同蜜种，确定九龙藤蜂蜜的特征标志物；将样品蜜种进行前处理后，采用液相色谱‑串联质谱法进行分析，检测样品蜜种是否含有(Z)‑EDTO特征标志物，从而鉴别样品蜜种是否为九龙藤蜂蜜。与现有技术相比，本发明提供的一种基于(Z)‑EDTO特征标志物鉴别九龙藤蜂蜜的方法，以(Z)‑EDTO特征标志物作为九龙藤蜂蜜中的特征标志物，对于准确鉴别九龙藤蜂蜜具有重要意义，操作简单，灵敏度高，准确度高，具有很大的应用前景。

技术领域

本发明涉及蜂蜜检测领域，具体涉及一种基于(Z)-EDTO特征标志物鉴别九龙藤蜂蜜的方法。

背景技术

蜂蜜是一种成分高度复杂的天然保健食品,富含很多对人体有益的营养物质,深受广大消费者青睐。蜂蜜是蜜蜂采集蜜源植物分泌的花蜜、蜜露或昆虫分泌的甘露，与蜜蜂唾液腺分泌物混合后在蜂巢内经多种转化作用充分酝酿并成熟的天然甜味物质。蜂蜜中含有丰富的营养物质，除主要的糖类外，还有水分、氨基酸、有机酸、蛋白质、矿物质、维生素、色素、芳香物质、蜂花粉、激素等。同时，对抗菌，增强免疫功能，止咳润肺，祛风除湿，健脾理气，抗肿瘤等方面有一定的作用。蜂蜜中的各种成分和含量随蜜源花种、地理环境、气候条件、养蜂技术等多种因素影响而异。由于蜜源植物种类、蜜源产地以及蜂种的不同，导致不同种类蜂蜜中营养成分和含量存在差异，其特征成分也成为鉴别蜂蜜种类的关键指标。

九龙藤蜂蜜是蜜蜂采集药用植物九龙藤(学名龙须藤、羊蹄藤)花蜜、分泌物与自身分泌物混合后，经充分酿造而成的一种天然甜味物质。多产自于中国广西等地区。九龙藤蜂蜜呈深琥珀色，晶莹剔透，具有一种特殊的药草香味，味道甜中微带清苦,舒口爽喉，回味悠长。此蜜天然无污染，能清热解毒，对咽喉炎、肺热咳嗽、便秘有良好的疗效，是一种难得的食疗佳品，被誉为“南国一绝,蜜中上品”。目前，尚未见采用(Z)-EDTO作为特征标志物来鉴别九龙藤蜂蜜的方法。

发明内容

为解决背景技术中提到的问题，本发明的目的在于提供一种操作简单，灵敏度高，准确度高的基于(Z)-EDTO特征标志物鉴别九龙藤蜂蜜的方法，可以满足作为鉴别九龙藤蜂蜜的判别依据的要求。

一种基于(Z)-EDTO特征标志物鉴别九龙藤蜂蜜的方法，关键在于：根据待测蜂蜜中是否含有式I的(Z)-8-ethylidene-6,7-dihydroxy-1,4,4-trimethyl-2-oxas((Z)-EDTO)特征标志物来鉴别九龙藤蜂蜜；

优选的，包括以下步骤：

S1.特征标志物的确定：分析对比不同地区九龙藤蜂蜜，确定九龙藤蜂蜜的特征标志物为(Z)-EDTO；

S2.样品前处理：将样品蜜种与水混合后，离心分离，取液相转移至HLB柱，用淋洗液淋洗，收集淋洗液，充分涡匀后过滤；

S3.上机分析：将滤液采用液相色谱-串联质谱法进行分析，检测是否含有九龙藤蜂蜜的特征标志物；

S4.根据样品蜜种中是否含有(Z)-EDTO，用于鉴别样品蜜种是否为九龙藤蜂蜜。

9.优选的，S1具体为：采用液相色谱-串联质谱全扫描分析不同地区九龙藤蜂蜜，将九龙藤蜂蜜中特征标志物的碎片离子信息进行表征，确定(Z)-EDTO特征标志物为式I所示：

优选的，S2具体为：将质量比为1：(2-4)的样品蜜种与水充分涡匀，调节pH值为7-8，在5000-10000r/min下，离心10-30min，取液相转移至HLB固相萃取柱上净化，用甲醇淋洗，收集淋洗液，充分涡匀后，用孔径为0.1-0.5μm滤膜过滤。

优选的，S3的色谱条件为色谱条件为：