[发明专利]一种醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质的检测方法

说明书

本发明公开了一种醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质的检测方法，它是采用高效液相色谱法检测。本发明检测方法能够同时准确测定醋酸泼尼松龙滴眼液中EP杂质A、EP杂质B、EP杂质C，EP杂质D和EP杂质E，从而解决醋酸泼尼松龙眼用混悬剂的质量控制问题，有利于对醋酸泼尼松龙眼用混悬剂进行质量管控。

技术领域

本发明涉及医药检测领域，具体涉及一种醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质的检测方法。

背景技术

醋酸泼尼松龙滴眼液是一种抗炎药物，它属于一种激素类的滴眼液，一般来说主要是用于眼部的炎症患者，比如虹膜睫状体炎，还有眼部的葡萄膜炎也可以使用这类滴眼液，激素对于眼部的炎症控制有较好的效果。

根据EP(欧洲药典)及成品工艺短期稳定性研究确定的降解杂质有3个，分别是EP杂质A、EP杂质B、EP杂质C，工艺杂质有两个，分别是EP杂质D、EP杂质E。

EP(欧洲药典)和USP(美国药典)中，仅给出API(原料药)的有关物质检测方法，方法复杂且成品中的辅料具有一定干扰，峰纯度不足，给有关物质检测带来相当大的难度。项竞佐等，RP—HPLC法测定帕利百中醋酸泼尼松龙的含量及其有关物质[J],药学服务与研究，2003，3(2)，提供了一种醋酸泼尼松龙眼用制剂中杂质的检测方法，经试验发现，该方法得到的色谱图中EP杂质A的峰纯度角(purityangle)大于纯度阈值(puritythreshold)，即峰纯度不足，致使不能准确测定醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质的含量。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质的检测方法，它是采用高效液相色谱法检测，具体步骤如下：

a、供试品溶液制备：取待测醋酸泼尼松龙滴眼液，加稀释剂溶解，即得；

b、对照品溶液制备：取醋酸泼尼松龙对照品，加稀释剂溶解，即得；

b、分别取对照品溶液和供试品溶液注入色谱仪，色谱条件如下：

色谱柱：以3.5μm的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

流动相：体积比70：30的水-乙腈；

流速：0.8ml/min；

所述稀释剂为30％，v/v乙腈水溶液。

进一步地，步骤a)所述醋酸泼尼松龙滴眼液与稀释剂的体积比为0.5～2.5：10ml。

进一步地，步骤b)所述对照品溶液中醋酸泼尼松龙的浓度为1～5μg/mL。

进一步地，所述色谱柱为XTERRAMS C18，规格150×4.6mm，3.5μm。

进一步地，步骤c)所述色谱条件中进样量10μL，波长为254nm，柱温为35℃，样品温度：5℃。

进一步地，所述供试品溶液的色谱图中有关物质色谱峰与醋酸泼尼松龙色谱峰的相对保留时间分别为EP杂质A 1.08、EP杂质B 0.35、EP杂质C 2.03、EP杂质D 0.66、EP杂质E2.11。

本发明还提供了一种醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质的含量测定方法，具体操作步骤如下：

1)取待测样品，按前述方法检测；

2)按如下公式计算有关物质的含量：

其中，Aspl为供试品溶液中醋酸泼尼松龙峰面积；Astd为六针对照品溶液中醋酸泼尼松龙平均峰面积；Wstd为对照品溶液中醋酸泼尼松龙称样量；Dstd为对照品溶液稀释倍数；L为待测样品中醋酸泼尼松龙的标示量；Dspl为待测样品稀释倍数；P为醋酸泼尼松龙对照品的纯度；RRF为杂质的相对响应因子。