[发明专利]一种多孔磷酸钙的蛋白质负载量的检测方法在审
| 申请号： | 202111650231.3 | 申请日： | 2021-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN114324210A | 公开（公告）日： | 2022-04-12 |
| 发明（设计）人： | 何亚清;曹雪华;吴文静;魏东升;王萌;岳述荣 | 申请（专利权）人： | 上海瑞邦生物材料有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31 |
| 代理公司： | 上海邦德专利代理事务所(普通合伙) 31312 | 代理人： | 梁剑 |
| 地址： | 201707 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 多孔 磷酸钙 蛋白质 负载量 检测 方法 | ||
1.一种多孔磷酸钙的蛋白质负载量的检测方法，其特征在于，包括：
(1)将负载有蛋白质的多孔磷酸钙溶解于盐酸溶液中，获得测试液；
(2)向所述测试液中加入Bradford工作液进行反应，获得反应液；
(3)测量所述反应液的吸光度；
(4)确定所述反应液的吸光度所对应的蛋白质浓度；
(5)基于所述蛋白质浓度，确定所述多孔磷酸钙的蛋白质负载量。
2.根据权利要求1所述的多孔磷酸钙的蛋白质负载量的检测方法，其特征在于，所述蛋白质为rhBMP-2蛋白质。
3.根据权利要求1所述的多孔磷酸钙的蛋白质负载量的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述盐酸溶液的浓度为0.5mol/L-2mol/L。
4.根据权利要求1所述的多孔磷酸钙的蛋白质负载量的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中，
所述负载有蛋白质的多孔磷酸钙与所述盐酸溶液的使用量比为1g：10-40mL。
5.根据权利要求1所述的多孔磷酸钙的蛋白质负载量的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中，
所述吸光度为在500nm-600nm波长光处的吸光度。
6.根据权利要求1所述的多孔磷酸钙的蛋白质负载量的检测方法，其特征在于，所述向所述测试液中加入Bradford工作液进行反应，包括：所述反应温度为20-40℃，所述反应时间为5-10min。
7.根据权利要求1所述的多孔磷酸钙的蛋白质负载量的检测方法，其特征在于，所述步骤(4)包括：
获得吸光度与蛋白质浓度对应的标准曲线；
将所述反应液的吸光度带入所述标准曲线，获得所述反应液的吸光度对应的蛋白质浓度。
8.根据权利要求7所述的多孔磷酸钙的蛋白质负载量的检测方法，其特征在于，所述获得吸光度与蛋白质浓度对应的标准曲线包括：
制备梯度浓度的蛋白质溶液，
检测不同浓度所述蛋白质溶液的吸光度，
以蛋白质浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，制得反映蛋白质浓度与吸光度关系的标准曲线。
9.根据权利要求8所述的多孔磷酸钙的蛋白质负载量的检测方法，其特征在于，所述制备梯度浓度的蛋白质溶液，包括：
所述梯度浓度的蛋白质溶液中蛋白质为标准牛血清蛋白。
10.根据权利要求1所述的多孔磷酸钙的蛋白质负载量的检测方法，其特征在于，所述步骤(5)包括，
所述蛋白质浓度与所述测试液体积的乘积除以所述负载有蛋白质的多孔磷酸钙的质量，即为所述多孔磷酸钙的蛋白质负载量。
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