[发明专利]一种固相和液相结合制备亮丙瑞林的方法

说明书

本发明公开了一种固相和液相结合制备亮丙瑞林的方法，属于多肽合成技术领域，具体涉及一种液相载体及其应用，本发明公开了由3‑乙氧基‑4‑羟基苯甲醛与2‑(2‑乙氧基苯氧基)溴乙烷在含有碳酸钾的DMF中反应得到液相载体，采用上述液相载体在液相中进行片段合成；所述片段合成得到Fmoc‑Arg‑Pro‑O‑液相载体；将上述步骤的产物脱去液相载体后，与固相树脂结合，然后按亮丙瑞林中氨基酸序列的顺序偶联氨基酸试剂得到亮丙瑞林基多肽树脂；将亮丙瑞林基多肽树脂切割后，分离出亮丙瑞林基多肽，然后进行乙胺化处理得到亮丙瑞林。

技术领域

本发明属于多肽合成技术领域，具体涉及一种固相和液相结合制备亮丙瑞林的方法。

背景技术

亮丙瑞林是一种促性腺激素释放激素类似物，它广泛用于治疗早熟、子宫内膜异位症、子宫肌瘤或绝经前乳腺癌等女性患者和前列腺癌等男性患者。亮丙瑞林的化学名为5-氧代-脯氨酰-组氨酰-色氨酰-丝氨酰-酪氨酰-D-亮氨酰-亮氨酰-精氨酰-N-乙基-脯氨酰胺，肽序：H-Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H₅，分子量1209.41。现有固相合成法合成亮丙瑞林中，从碳端开始连接上所有氨基酸后，使用乙胺液体从树脂上切割下来，然而使用液体乙胺切割，需要在低温、带压力密封下进行，在工业化生产中不方便，难以大规模生产。开发亮丙瑞林的制备方法仍有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种可用于合成亮丙瑞林的液相载体。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种液相载体，包括：由3-乙氧基-4-羟基苯甲醛与2-(2-乙氧基苯氧基)溴乙烷在含有碳酸钾的DMF中反应后经还原剂还原得到，还原剂为硼氢化钠。

优选地，液相载体的制备中，将碳酸钾加入DMF中，然后加入3-乙氧基-4-羟基苯甲醛与2-(2-乙氧基苯氧基)溴乙烷，通氮气保护，在60-80℃的温度下搅拌反应18-48 h，加入去离子水析出沉淀，过滤，洗涤，干燥，得到苯甲醛类化合物；氮气保护下，将苯甲醛类化合物加入四氢呋喃溶液中，加入硼氢化钠，在30-50℃的温度下搅拌反应2-10 h，反应完成后，向溶液中加入去离子水析出沉淀，过滤，洗涤，干燥，得到液相载体。

更优选地，碳酸钾的使用量为DMF的0.6-3 wt%。

更优选地，3-乙氧基-4-羟基苯甲醛的添加量为DMF的2-9 wt%。

更优选地，2-(2-乙氧基苯氧基)溴乙烷的添加量为DMF的3-12 wt%。

更优选地，四氢呋喃溶液由四氢呋喃与甲醇混合，四氢呋喃溶液中甲醇的含量为4-16 wt%。

更优选地，苯甲醛类化合物的使用量为四氢呋喃溶液的1-4 wt%。

更优选地，硼氢化钠的使用量为苯甲醛类化合物的10-50 wt%。

本发明的目的在于提供一种固液相结合制备亮丙瑞林的方法。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种制备亮丙瑞林的方法，包括：

采用上述液相载体在液相中进行片段合成；所述片段合成得到Fmoc-Arg-Pro-O-液相载体；

将Fmoc-Arg-Pro-O-液相载体脱去液相载体后，与固相树脂结合，然后按亮丙瑞林中氨基酸序列的顺序偶联氨基酸试剂得到亮丙瑞林基多肽树脂；