[发明专利]一种基于靶向代谢组学鉴定漂白紫胶的方法

权利要求书

1.一种基于靶向代谢组学鉴定漂白紫胶的方法，其特征是：包括如下步骤：

1)基于代谢组学筛选漂白紫胶的标志性代谢物；

2)对待测样本进行HPLC分析，确定待测样本中含有的化合物种类；

3)如果待测样本中含有漂白紫胶的标志性代谢物，则待测样本中含有漂白紫胶；如果待测样本中不含有漂白紫胶的标志性代谢物，则待测样本中不含有漂白紫胶。

2.如权利要求1所述的方法，其特征是，步骤1)中所述标志性代谢物为：SAI，9,10-DEA，JA，SA，LLA，JAI和9,10-DAA。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征是，按照如下方法筛选标志性代谢物：

1A)选择至少20个漂白紫胶样本，并对每个样本分别进行皂化处理，获得皂化漂白紫胶目标物；然后用甲醇溶解皂化漂白紫胶目标物，制成浓度为5-15mg/mL的漂白紫胶HPLC进样溶液，备用；

1B)对每个漂白紫胶样本的漂白紫胶HPLC进样溶液进行HPLC-MS分析、HPLC-ELSD分析，获得每个样本对应的HPLC-MS数据和HPLC-ELSD数据；

1C)根据每个漂白紫胶样本的HPLC-MS数据，根据每个样本中含有的化合物的分子量和离子碎片特征，确定每个漂白紫胶样本中含有的化合物、化合物结构；确定每个漂白紫胶样本中均含有的共性靶向代谢物；

1D)根据HPLC-ELSD的分析结果，通过归一化法计算每个漂白紫胶样本中含有的每一个共性靶向代谢物在各对应漂白紫胶样本中的相对含量；

1E)将所有漂白紫胶样本的共性靶向代谢物在每个漂白紫胶样本中的相对含量进行无监督的主成分分析、有监督的偏最小二乘判别分析，对样本进行聚类分析，根据样本的聚类特征，选择有监督的偏最小二乘判别分析模型；

1F)在有监督的偏最小二乘判别分析模型中，采用代谢组学差异性分析方法对每个共性靶向代谢物在漂白紫胶样本中的代表性进行分析，根据获得的共性靶向代谢物变量的VIP值和载荷分布特征，筛选获得漂白紫胶的标志性代谢物。

4.如权利要求3所述的方法，其特征是，步骤1A)中所述的漂白紫胶样本来源于至少2个不同的产地或至少2个不同的生产工艺制备的漂白紫胶产品。

5.如权利要求3所述的方法，其特征是，步骤1B)中HPLC-MS分析过程中的进行高效液相色谱分析的流动相：乙腈B-0.1％甲酸水溶液D。

6.如权利要求5所述的方法，其特征是，高效液相色谱分析过程中进行梯度洗脱，流动相乙腈B(5％-100％)60min。

7.如权利要求5所述的方法，其特征是，步骤1C)中确定每个漂白紫胶样本均含有的化合物为共性靶向代谢物，其中，所述共性靶向代谢物共有15种：具体如下：SA，JA，JAI，SAI，LSA，LLA，LJA，LA，Ale，9,10-DTA，9,10-DEA，9,10-DAA，BA，16-H-9-A，16-HAA。

8.如权利要求1或2所述的方法，其特征是，步骤2)中的HPLC分析过程中，高效液相色谱条件如下：流动相为：乙腈B-0.1％甲酸水溶液D；梯度洗脱，流动相中乙腈B(5％-100％)60min(即流动相中的乙腈的体积浓度在60min内从5％线性递增至100％)。

9.一种鉴定待测样本中含有漂白紫胶的方法，其特征是：包括如下步骤：

1)基于代谢组学筛选漂白紫胶的差异性代谢物和标志性代谢物；

2)对待测样本进行HPLC分析，确定待测样本中含有的化合物种类；

3)如果待测样本中含有漂白紫胶的差异性代谢物和标志性代谢物，则待测样本中含有漂白紫胶；如果待测样本中不含有漂白紫胶的差异性代谢物和标志性代谢物，则待测样本中不含有漂白紫胶。

10.如权利要求9所述的方法，其特征是，所述差异性代谢物为16-H-9-A,Ale,16-HAA,9,10-DTA,LA。