[发明专利]一种人工诱导黄鳝直接定向发育为雄性的培育方法

说明书

本发明属于水产动物遗传育种技术领域，公开了一种人工诱导黄鳝直接发育为雄性的培育方法，其步骤：A：驯化黄鳝幼鱼摄食配合饲料；B：饲喂含有来曲唑的配合饲料；C：饲喂来曲唑的黄鳝生长到6月龄时性腺转化为精巢，黄鳝直接发育为雄性。方法易行，操作简便，将1年龄的黄鳝直接诱导为雄性且具备正常的生殖能力。该方法可以直接获得不经过雌性成熟阶段而直接发育为雄性的黄鳝，能有效应用于黄鳝苗种生产和遗传育种研究，具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于水产动物遗传育种技术领域，更具体涉及一种人工诱导黄鳝直接定向发育为雄性的培育方法，采用该方法可将1年龄的黄鳝直接培育为具有生殖能力的雄性。适用于黄鳝养殖中短时间、大规模获得雄性黄鳝亲鱼用于苗种生产，以及黄鳝遗传育种过程中快速获得性状改良的黄鳝新种质。

背景技术

鱼类性别分化受遗传因子和环境因素影响。鲤鱼、鳜鱼等雌雄异体鱼类中性激素在性别分化中发挥重要的作用，雌激素具有维持雌性性征的功能，雄激素具有维持雄性性征的作用。因此，人们普遍采用增加雌激素诱导鱼类分化为雌性，增加雄激素则促使其向雄性转变。如：采用投喂含雌激素和氟他胺的饲料诱导遗传雄性的鲤鱼转变为有功能的雌鱼(Jiang et al.,2018)；采用投喂含甲基睾酮的饲料诱导雌鳜逆转为伪雄鳜(Liu et al.,2021)；雌性虹鳟幼鱼采用甲基睾酮水溶液浸泡可性逆转为雄性(Weber et al.,2020)。

根据雌雄异体鱼中应用雄激素处理成功获得性逆转雄鱼的方法，研究人员也都是尝试采用雄激素处理，希望能将雌性黄鳝性逆转为雄性。然而，已有的研究报道和生产实践均表明增添雄激素无法诱导雌性黄鳝性逆转为有功能的雄性(Tang et al.,1974；赵云芳等，1992)。

黄鳝作为一种雌雄同体先雌后雄的鱼类，性腺分化发育与雌雄异体的鱼类不同，黄鳝的性腺首先发育为卵巢，产卵后再逐渐转化为精巢。黄鳝雌性先熟然后转换为雄性的繁殖方式导致雄性亲鱼培育时间需要3年以上，且获得的高质量雄鱼数量较少。黄鳝是我国重要的名特优养殖对象，但养殖黄鳝的苗种还主要依赖于捕捞野生幼鱼。苗种来源不稳定，存活率低，养殖性状参差不齐是当前黄鳝养殖的主要困境。黄鳝养殖生产和遗传育种研究均需要大量的高质量雄性亲本。但是，黄鳝雌雄同体、先雌后雄的特征导致养殖生产和研究工作中雄性亲本的获得极为困难。

性激素在鱼类雌雄性别分化中扮演重要角色，性腺处于雌激素环境发育卵巢，性腺处于雄激素环境发育为精巢。雄激素处理常用于诱导遗传雌性的鱼性逆转为生理雄性。然而，雄激素处理雌性黄鳝无法获得提前性逆转的有功能的雄性。成熟的雌鳝采用多剂量的雄性激素(包括甲基睾酮、睾酮、11-酮睾酮等)处理均不能诱导其卵巢转化为有功能的精巢(TangF,Chan S T,Lofts B,Effect of steroid hormones on the process ofnatural sex reversal in the rice-field ee,Monopterus albus.Gen CompEndocrinol,1974,24(3):227-242.)。黄鳝胚胎时期以及仔鳝进行甲基睾酮处理可诱导部分黄鳝提早性逆转，但诱导性转换效率非常低，其无法获得有功能的精子(赵云芳，柯熏陶，外源激素诱导黄鳝性转化的效果。西南农业学报,1992，5(1)：74-78)。常规的采用雄激素处理不使用于诱导黄鳝发育类雄性。

因此，建立快速、有效的雄性黄鳝培育方法是黄鳝养殖业和遗传育种研发亟待解决的难题。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种诱导黄鳝直接定向发育为雄性的培育方法，方法易行，操作简单，避免了性激素处理。该方法可大规模培育黄鳝雄性亲本，用于黄鳝苗种的人工繁育；该方法还可将同一家系的部分个体诱导为雄性，同时获得雌、雄全同胞亲本群体用于繁殖自交后代，加快优良品系的建立，从而提高遗传育种的效率。人工诱导黄鳝直接定向发育为雄性的方法可快速获得雄性亲本，将显著缩短优良养殖性状黄鳝新品种的培育周期，具有明显的应用价值。

为了实现上述目的，本发明采用了以下技术措施：