[发明专利]一种抗体复合物、生物传感器及SARS-CoV-2的ECL检测平台和检测方法

权利要求书

1.一种纳米复合物，其特征在于，其包括如下原料：β-环糊精、共反应物和金属纳米粒子，所述金属纳米粒子原位生长于所述β-环糊精上，所述金属纳米粒子与所述共反应物的氨基通过金属-N键共价连接，且所述共反应物位于所述β-环糊精的疏水内腔中，所述共反应物为带有氨基的疏水化合物。

2.根据权利要求1所述的纳米复合物，其特征在于，所述金属纳米粒子选自铂、铅、锌、锡、铜、金或银；

优选地，所述共反应物为3-(二丁基氨基)丙胺、N,N二甲基乙二胺、N,N二乙基乙二胺、N,N二异丙基乙二胺、三丙胺、三乙胺或四甲基乙二胺。

3.一种如权利要求1或2所述的纳米复合物的制备方法，其特征在于，其包括：将含金属离子的溶液与β-环糊精混合，经还原，反应得到β-环糊精-金属纳米粒子复合物，然后将所述β-环糊精-金属纳米粒子复合物与共反应物混合反应得到结合有共反应物的纳米复合物。

4.根据权利要求3所述的纳米复合物的制备方法，其特征在于，将含金属离子的溶液与β-环糊精混合，所述含金属离子的溶液与β-环糊精的混合时的体积质量比为：10-100μL：1-3mg；且所述含金属离子的溶液的体积浓度为1-1.2％；

优选地，将含所述金属纳米粒子的溶液与β-环糊精混合后的溶液进行搅拌，加入还原剂进行反应，然后加入柠檬酸钠获得β-环糊精-金属纳米粒子复合物；

优选地，在与所述共反应物混合前，还包括将所述β-环糊精-金属纳米粒子复合物进行水洗，获得β-环糊精-金属纳米粒子复合物的分散液；所述搅拌的时间为12h-14h；

优选地，所述β-环糊精-金属纳米粒子复合物与共反应物的混合体积比为70-200:1，且所述β-环糊精-金属纳米粒子复合物与共反应物混合反应时间为10-18h，反应温度为0-5℃。

5.一种抗体复合物，其特征在于，其包括：权利要求1-2任一项所述的纳米复合物或权利要求3-4任一项所述的制备方法制得的纳米复合物，以及抗体，所述纳米复合物的金属纳米粒子与所述抗体的氨基通过金属-N键共价结合；

优选地，所述抗体为抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白的抗体。

6.一种抗体复合物的制备方法，其特征在于，其包括：将β-环糊精-金属纳米粒子复合物、共反应物、抗体进行混合反应；

或，将权利要求1-2任一项所述的纳米复合物直接与抗体进行混合反应；

优选地，所述混合反应中添加的所述抗体是以抗体溶液的形式添加，所述抗体溶液的浓度为45-200μg/mL；优选为50μg/mL；

优选地，所述β-环糊精-金属纳米粒子复合物、共反应物、所述抗体溶液的混合体积比为1:70-200:10；

优选地，混合反应后的溶液进行封闭、离心、分散；所述分散是在PBS溶液中进行；

优选地，所述PBS的pH为7-8；优选地，所述PBS的pH为7.4。

7.一种生物传感器，其特征在于，其包括：工作电极，所述工作电极上修饰有ECL发光体，所述ECL发光体上偶联有抗体；所述ECL发光体选自羧基功能化的聚[2,5-二辛基-1,4-亚苯基]纳米粒子；

优选地，所述抗体为抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白的抗体。

8.一种如权利要求7所述的生物传感器的制备方法，其特征在于，其包括：将修饰有ECL发光体的工作电极进行活化，然后将活化后的工作电极与所述抗体孵育，封闭；

优选地，所述制备方法还包括在工作电极上修饰ECL发光体，其包括：在所述工作电极上包覆羧基功能化的聚[2,5-二辛基-1,4-亚苯基]的纳米分散液，干燥；

优选地，所述制备方法还包括羧基功能化的聚[2,5-二辛基-1,4-亚苯基]纳米分散液的制备，其包括将PDP与PSMA混合，加水后进行蒸发，获得羧基功能化的聚[2,5-二辛基-1,4-亚苯基]纳米分散液。

9.一种SARS-CoV-2的ECL检测平台，其特征在于，其包括权利要求7所述的生物传感器、权利要求5所述的抗体复合物。

10.一种使用权利要求9所述的SARS-CoV-2的ECL检测平台进行SARS-CoV-2的检测方法，所述检测方法为非疾病的诊断目的，其特征在于，其包括：将所述生物传感器与待测样本混合孵育，然后加入所述抗体复合物孵育，通过电极系统记录ECL信号；

优选地，所述生物传感器与待测样本混合孵育时间为55-120min；优选为60min；

优选地，加入所述抗体复合物后的孵育时间为55-80min；优选为60min；

优选地，ECL信号检测在PBS中进行，扫描电位为0V至+1.5V，扫描速率和光电倍增管分别设置为300mV/s和800V。