[发明专利]一种抗体复合物、生物传感器及SARS-CoV-2的ECL检测平台和检测方法

说明书

本发明公开了一种抗体复合物、生物传感器及SARS‑CoV‑2的ECL检测平台和检测方法，涉及电化学发光检测技术领域。一种纳米复合物包括如下原料：β‑环糊精、共反应物和金属纳米粒子，其中金属纳米粒子原位生长于β‑环糊精上，金属纳米粒子与共反应物的氨基通过金属‑N键共价连接，同时共反应物还被富集于β‑环糊精的疏水内腔中。金属纳米粒子与共反应物通过金属‑N键共价连接，共反应物还富集在β‑环糊精的疏水空腔中，由此实现电极表面的共反应物高固载量，从而大幅提高了后续ECL发光体的信号强度，有利于提高对于待测物的检测灵敏度。

技术领域

本发明涉及电化学发光检测技术领域，具体而言，涉及一种抗体复合物、生物传感器及SARS-CoV-2的ECL检测平台和检测方法。

背景技术

严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)在世界范围内造成了许多死亡。作为SARS-CoV-2的四种主要结构蛋白之一，核衣壳蛋白具有最丰富结构特征，通常被认为是SARS-CoV-2的生物标志物。最近，已开发出多种检测SARS-CoV-2核衣壳蛋白(ncovNP)的方法，例如酶联免疫吸附测定(ELISA)、荧光素酶IP系统(LIPS)和侧向流动测定(LFA)。然而，这些方法存在灵敏度低、操作复杂等缺陷，现有的检测方法存在应用上的限制。因而开发一种灵敏且简单的ncovNP检测方法至关重要。

电致化学发光(ECL)技术具有背景低、灵敏度高、操作简单等特点，在临床分析、环境监测和食品安全等领域受到广泛关注。已有报道使用ECL方法进行SARS-CoV-2相关的核酸检测。虽然该方法的检测灵敏度较高，但存在提取过程繁琐、结果假阴性等缺点。与核酸检测相比，蛋白质检测具有操作更简单、特异性更高、准确度更高的特点。迄今为止，关于ncovNP的ECL蛋白检测的报道很少。

优秀的ECL发光体是实现高灵敏度ECL检测的关键之一。在有机聚合物、无机配合物、有机小分子以及金属纳米团簇和各种量子点等无机纳米材料等众多ECL发光体中，有机聚合物由于具有高光稳定性、低细胞毒性和易于功能化等优点而备受关注。已报道的ECL信号探针的有机聚合物主要包括聚芴和聚芴衍生物、聚(亚苯基亚乙烯基)和含杂环的聚合物。例如，聚芴衍生物PFBT和PFO被开发为ECL发光体，以实现真彩色ECL成像分别用于多重检测和microRNA-155的比率检测。崔课题组以具有强双极ECL发射的含杂环噻吩共轭微孔聚合物作为发光体检测罗丹明B(Cui,L，2021)。鞠课题组制备了具有高ECL效率的含聚(亚苯基亚乙烯基)的聚合物点构建检测Fe³⁺的ECL生物传感器(Feng,Y.Q.2018)。然而，文献报道的有机聚合物种类有限，因此，开辟新的ECL聚合物发光体具有重要意义。

此外，共反应物的引入对于高灵敏度ECL检测也至关重要。引入共反应物的最常见方法是将它们直接添加到检测底液中。这种方法虽然简单，但存在ECL系统的稳定性和重复性问题。酶催化反应原位产生共反应物面临复杂的操作和苛刻的酶使用条件，因此其应用受到极大的限制。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗体复合物、生物传感器及SARS-CoV-2的ECL检测平台和检测方法以解决上述技术问题。

发明人发现将共反应物固载到电极表面可以克服引入共反应物方式的缺点，例如采用共价键合和交联。然而，在电极表面实现共反应物高固载量仍然具有技术上挑战性，而如何实现电极表面的共反应物高固载量是亟需解决的技术难题。

由于疏水局部富集可以显著提高电极表面共反应物的浓度，因此通过具有疏水腔的材料富集共反应物可能是实现电极表面共反应物高固载的理想选择。研究表明，共反应物的局部疏水富集若针对检测溶液中存在的共反应物，这仍然会导致ECL系统的稳定性和重复性问题。