[发明专利]一种靶向递送疫苗的制备方法及红细胞疫苗

权利要求书

1.一种靶向递送疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：获取外周血并保存于抗凝采血管中；

S2：将外周血的红细胞与淋巴细胞分离，收集红细胞；

S3：收集的红细胞用0.01M的PBS或0.9％生理盐水清洗-离心若干次，获得初次离心后的红细胞；

S4：向离心后的红细胞中加入浓度为55.6％-83.3％的1xPBS或0.9％生理盐水进行稀释，随后加入疫苗成分，低温保存0.1-8小时，获得混合红细胞、疫苗混合物；

S5：调整红细胞、疫苗混合物中的PBS浓度为0.01M，低温保存0.1-8小时；或者调整红细胞、疫苗混合物中的NaCl浓度为0.9％，低温保存0.1-8小时；

S6：离心收集红细胞，随后加入CD47抗体或CpG孵育0.1-8小时；

S7：用0.01M的PBS或0.9％生理盐水清洗-离心若干次，获得再次离心后的红细胞，为红细胞疫苗，即为靶向递送疫苗。

2.根据权利要求1所述的一种靶向递送疫苗的制备方法，其特征在于，在步骤S2中，红细胞与淋巴细胞分离的方法可采用以下任意一种：淋巴细胞分离液分离方法、血液透析分离方法、密度梯度离心分离方法。

3.根据权利要求1所述的一种靶向递送疫苗的制备方法，其特征在于，在步骤S3中，红细胞表面若既不含A抗原又不含B抗原，用于制备通用型红细胞疫苗，用于自体和异体红细胞疫苗制备与疫苗接种；输血原则适用于本红细胞疫苗使用原则。

4.根据权利要求1所述的一种靶向递送疫苗的制备方法，其特征在于，在步骤S4中，还包括：预先对离心后的红细胞进行电击，电击的工作电压150V，电击15ms。

5.根据权利要求1所述的一种靶向递送疫苗的制备方法，其特征在于，在步骤S5中，疫苗成分为具有免疫调节的组分；所述免疫调节的组分包含抗原多肽序列和/或抗原mRNA序列和/或抗原DNA序列和/或灭活病原微生物和/或减毒病原微生物和/或TLR受体激动剂。

6.根据权利要求1所述的一种靶向递送疫苗的制备方法，其特征在于，在步骤S3和S7中，清洗-离心的次数均为两次。

7.根据权利要求1-6任一项所述的一种靶向递送疫苗的制备方法，其特征在于，所述红细胞疫苗，用于制备预防和治疗免疫相关疾病的药物的应用；所述免疫相关疾病包括：癌症、病原感染疾病、自身免疫缺陷疾病；所述癌症包括：B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、蕈样真菌病、霍奇金氏病、髓细胞性白血病、膀胱癌、脑癌、神经系统癌症、头颈癌、头颈部鳞状细胞癌、肺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、皮肤癌、黑色素瘤、基底细胞癌、鳞状细胞癌、肝癌、口腔、咽喉、喉部和肺的鳞状细胞癌、宫颈癌、乳腺癌、肾癌、泌尿生殖系统癌症、肺癌、食管癌、头颈癌、大肠癌、造血系统癌症；睾丸癌；结直肠癌、前列腺癌、AIDS相关的淋巴瘤或AIDS相关的肉瘤的任意一种；病原感染疾病包括：细菌、病毒、真菌、寄生虫的任意一种病原体侵入人体所引起的局部组织和全身性炎症反应；所述自身免疫缺陷疾病包括：慢性淋巴性甲状腺炎、甲状腺功能亢进、1型糖尿病、重症肌无力、慢性溃疡性结肠炎、恶性贫血伴慢性萎缩性胃炎、肺出血肾炎综合征、寻常天疱疮、类天疱疮、原发性胆汁性肝硬变、多发性脑脊髓硬化症、急性特发性多神经炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、系统性硬化症、结节性多动脉炎、Wegener肉芽肿病的任意一种。

8.根据权利要求7所述的一种靶向递送疫苗的制备方法，其特征在于，所述红细胞疫苗采用静脉注射方式注射。

9.根据权利要求7所述的一种靶向递送疫苗的制备方法，其特征在于，外周血采用自体外周血或异体同血型外周血或异体O型血。

10.一种红细胞疫苗，其特征在于，采用权利要求1-9任一项所述的靶向递送疫苗的制备方法制成。