[发明专利]用于检测血液中可溶性生长刺激表达基因2蛋白(ST2)的试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测血液中可溶性生长刺激表达基因2蛋白(ST2)的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含第一试剂，第二试剂，校准品，

其中所述第一试剂包含3-50g/L的电解质、1-50g/L的促进剂、0.5-20g/L防腐剂、0.5-40g/L表面活性剂和pH为6-9的1-100mmol/L的缓冲液；

所述第二试剂包含：ST2抗体或其抗原结合片段，按w/v计0.05％-5％的带有羧基的聚苯乙烯微球，和pH为5.5～9.5的1-200mmol/L的缓冲液，

所述校准品包含已知浓度的抗原。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，

所述电解质选自钠离子或钾离子，

所述促进剂选自聚乙二醇4000-20000，更优选聚乙二醇6000，

所述防腐剂选自叠氮钠、苯甲酸钠、亚硝酸钠、硫柳汞、ProClin100、ProClin200、ProClin250、ProClin300、ProClin350中的一种或多种，更优选ProClin300，

所述表面活性剂选自Tween20、Tween40、Span40、Span80、TritonX-100中的一种或多种，更优选Tween20，

所述缓冲液选自PB缓冲液、EMS缓冲液或Tris缓冲液。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第二试剂的制备方法包括以下步骤：

(1)将10mg带有羧基的聚苯乙烯微球加到1mL pH6.5的1-100mmol/L EMS缓冲液中，

(2)加入10～30μL 15～25mg/mL EDC活化20～30min，离心，沉淀重悬于1mL pH6.5的1-100mmol/L EMS缓冲液中，

(3)加入0.2～0.8mg ST2抗体，18-28℃混匀40～80min，离心，去掉上清，向沉淀中加入1mL pH6.5的1-100mmol/L EMS缓冲液，超声1～3min，

(4)加入0.1～0.3mL 10％BSA，18-28℃混匀40～80min，超声1～3min，

(5)加入pH5.5-9.5的1-200mmol/L PB缓冲液至5mL，密封2-8℃保存备用。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述校准品包含：0.0ng/mL、12.5ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL浓度的ST2抗原以及缓冲液和保护剂，

优选地，所述缓冲液选自PB缓冲液、EMS缓冲液或Tris缓冲液，

优选地，所述保护剂选自牛血清白蛋白、海藻糖。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含质控品。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述质控品包含：33ng/mL和90ng/mL浓度的抗原以及缓冲液和保护剂，

优选地，所述缓冲液选自PB缓冲液、EMS缓冲液或Tris缓冲液，

优选地，所述保护剂选自牛血清白蛋白、海藻糖。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述ST2抗体为单克隆抗体。