[发明专利]一种抗前胃泌素释放肽单链抗体及其制备方法与用途

说明书

本发明属于抗体药物技术领域，涉及一种抗前胃泌素释放肽单链抗体及其制备方法与用途。所述的单链抗体包含重链可变区V_H和轻链可变区V_L，并可选的包含用于连接重链可变区V_H和轻链可变区V_L的连接肽，所述的重链可变区V_H包含HCDR1、HCDR2、HCDR3，三者的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.5‑7所示，所述的轻链可变区V_L包含LCDR1、LCDR2、LCDR3，三者的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.8‑10所示。利用本发明的抗前胃泌素释放肽单链抗体及其制备方法，能够更好的制备抗前胃泌素释放肽单链抗体，制得抗前胃泌素释放肽单链抗体可更好的用于SCLC靶向诊治。

技术领域

本发明属于抗体药物技术领域，涉及一种抗前胃泌素释放肽单链抗体及其制备方法与用途。

背景技术

肺癌(Lung Cancer)是发病率和死亡率都极高的恶性肿瘤，其中小细胞肺癌(Small Cell Lung Cancer，SCLC)是恶性度较高，治愈率较低的一种肺癌，约占肺癌的15％-20％。SCLC的特点是瘤体倍增时间短、预后差、分化程度最低、极易转移，5年生存率仅为1％-7％。但SCLC对放化疗敏感，如早期发现采用全身化疗伴局部放疗等综合治疗手段，3年生存率可达30％以上。但是SCLC患者早期症状不明显，通过病理学和影像学检查获得早期诊断殊为不易，确诊时病情往往已经发展至广泛期，错过最佳治疗时间，因此SCLC的早期诊断和治疗至关重要。

前胃泌素释放肽(Pro-Gastrin Releasing Peptide，PGRP)是SCLC的可靠、灵敏、特异性的肿瘤标志物，在血液中相对稳定。在物理诊断尚不明确前即可检测到PGRP，阳性率高达76％，已被用于SCLC早期临床诊断。PGRP由信号肽、胃泌素释放肽(Gastrin ReleasingPeptide，GRP)、酶切位点、恒定区以及可变的羧基末端组成。

随着基因工程技术的发展，治疗性抗体药物逐渐占据全球市场，用于对恶性肿瘤和自身免疫病等疾病的诊断和治疗。抗PGRP单克隆抗体及基因工程抗体的研制是SCLC靶向诊治方向之一，可为SCLC病人的诊断和治疗奠定一定的技术和物质基础。

人源化基因工程抗体包括全长抗体以及小型抗体等。其中，全长抗体包括嵌合抗体、CDR移植型抗体；小型抗体包括单链抗体、Fab及F(ab)’2片段抗体，双特异性抗体以及域抗体等。其中，单链抗体(single chain antibody，ScFv)是抗体分子保留抗原结合部位的最小功能片段，其全长约为完整抗体分子的1/6。ScFv的关键技术是通过一段约15～25个氨基酸残基构成的连接肽将抗体的重链可变区(Heavy-chain variable region，V_H)和轻链可变区(Light-chain variable region，V_L)进行连接重组。相对于完整抗体，ScFv能够降低其免疫原性，且ScFv分子量较小，更容易进入肿瘤组织。人们还可以根据治疗的需要，制备新型抗体以携带治疗药物，并且可以采用原核、真核细胞等多种方式大量表达，降低生产成本。

发明内容

本发明的首要目的是提供一种抗前胃泌素释放肽单链抗体，以能够更好的用于SCLC靶向诊治。

为实现此目的，在基础的实施方案中，本发明提供一种抗前胃泌素释放肽单链抗体，所述的单链抗体包含重链可变区V_H和轻链可变区V_L，并可选的包含用于连接重链可变区V_H和轻链可变区V_L的连接肽，

所述的重链可变区V_H包含HCDR1(重链互补决定区1)、HCDR2(重链互补决定区2)、HCDR3(重链互补决定区3)，三者的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.5-7所示，