[发明专利]一种抗HLA-G1，-G2，-G5及HLA-G6异构体分子的单克隆抗体及其用途

说明书

本发明公开了一种抗HLA‑G1，‑G2，‑G5及HLA‑G6异构体分子的单克隆抗体(YHWG‑3)及用途，所述抗体(YHWG‑3)由保藏编号为CCTCC NO:202121的杂交瘤产生，采用HLA‑G异构体分子(HLA‑G1，HLA‑G2，HHLA‑G5及HLA‑G6)共有的，位于HLA‑G分子重链α3结构域第209～226位氨基酸序列抗原肽(KTHVTHHPVFDYEATLRC)为免疫原。本发明提供了编码本发明所述YHWG‑3抗体的核苷酸及其编码氨基酸序列,本发明还提供了所述YHWG‑3抗体用于HLA‑G异构体分子(HLA‑G1，HLA‑G2，HLA‑G5及HLA‑G6)免疫组化、免疫印迹及流式细胞术等检测的用途。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及抗HLA-G异构体分子(HLA-G1，HLA-G2，HLA-G5 及HLA-G6)抗体(YHWG-3)的以下方面：采用HLA-G异构体分子(HLA-G1，HLA-G2， HHLA-G5及HLA-G6)共有的，位于HLA-G分子重链α3结构域第209～226氨基酸序 列(KTHVTHHPVFDYEATLRC)的抗原肽为免疫原，制备抗HLA-G异构体分子(HLA-G1， HLA-G2，HLA-G5及HLA-G6)的单克隆抗体(YHWG-3)；编码本发明所述YHWG-3抗 体的核苷酸及其编码的氨基酸序列，以及所述抗体(YHWG-3)用于免疫组化、免 疫印迹及流式细胞术检测等用途。

背景技术

人类白细胞抗原-G(human leukocyte antigen-G,HLA-G)基因，全长6.0kb， 位于人类第6号染色体短臂远侧6p21.3。在蛋白质翻译过程中，HLA-G mRNA第 1外显子编码信号肽，第2、3和第4外显子分别编码细胞外区的α1、α2和α3 结构域，第5位外显子编码跨膜区；第6外显子编码仅含6个氨基酸残基的HLA-G 分子胞内段；由于外显子6内含有终止密码子，第7外显子不被转录；第8外显 子对应于HLA-G基因的3′UTR。HLA-G初始转录产物经选择性剪接，可产生7 种成熟mRNA，分别编码7种不同分子量的异构体分子(HLA-G1、-G2、-G3、-G4、-G5、-G6及HLA-G7)。其中HLA-G1、HLA-G2、HLA-G3及HLA-G4含有跨细胞膜 区，为膜结合型异构体；HLA-G5、HLA-G6及HLA-G7缺乏跨细胞膜结构，为可溶 性异构体。HLA-G1～-G7异构体分子的分子量分别为39kD,31kD,22kD,30kD, 34kD,23kD及16kD。

HLA-G1是由全长HLA-G mRNA编码，由胞外区α1、α2及α3结构域，跨膜 区及胞内结构域组成。HLA-G2缺乏α2结构域，由胞外区α1及α3结构域，跨 膜区及胞内结构域组成；HLA-G3缺乏α2和α3结构域，由胞外区α1结构域， 跨膜区及胞内结构域组成；HLA-G4缺乏α3结构域，由胞外区α1及α2结构域， 跨膜区及胞内结构域组成；胞外区结构域分别与HLA-G1及HLA-G2相同，但它们 由含有内含子4的HLA-G mRNA编码，因内含子4中含有终止密码子，所编码的 蛋白分子缺乏由外显子5所编码的跨膜区，形成可溶性HLA-G分子。编码HLA-G7 的mRNA由于内含子2中含有终止密码子，胞外区仅含α1结构域及由内含子2 所编码的2个氨基酸残基相连(图1)。