[发明专利]格尔德霉素及其类似物的新用途在审
申请号: | 202210373144.6 | 申请日: | 2022-04-11 |
公开(公告)号: | CN114982763A | 公开(公告)日: | 2022-09-02 |
发明(设计)人: | 郭志凯;吴炜城;张世清;熊子君 | 申请(专利权)人: | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 |
主分类号: | A01N43/46 | 分类号: | A01N43/46;A01P1/00;A01P3/00;C07D225/06;C12P17/10;C12R1/465 |
代理公司: | 珠海市君佳知识产权代理事务所(普通合伙) 44644 | 代理人: | 刘战胜 |
地址: | 571001 *** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 格尔德 霉素 及其 类似物 用途 | ||
1.格尔德霉素及其类似物的新用途,其特征是:所述格尔德霉素及其类似物在制备对多种植物病原菌或植物病害具有广谱抗菌效果的药物中的应用,其中所述格尔德霉素及其类似物为具有如下所示结构的化合物1、化合物2和化合物3中的一种或几种:
2.根据权利要求1所述的应用,其特征是:所述植物为黄瓜、辣椒、木瓜、豇豆、芒果、香蕉、水稻、小麦或橡胶树。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征是:所述植物病原菌为炭疽菌属真菌、棒孢菌属真菌、镰刀菌属真菌、疫霉属真菌、毛色二孢属真菌、梨孢菌属、拟茎点霉属真菌和黄单胞细菌中的一种或几种。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征是:所述植物病害包括香蕉枯萎病菌、香蕉炭疽病菌、辣椒炭疽病菌、辣椒棒孢叶斑病菌、辣椒疫病菌、木瓜炭疽病菌、木瓜褐色蒂腐病菌、木瓜溃疡病菌、豇豆灰斑病菌、芒果炭疽病菌、橡胶炭疽病菌、小麦赤霉病菌、水稻稻瘟病菌、黄瓜根腐病菌、水稻白叶枯病菌和芒果细菌性角斑病菌中的一种或几种。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征是所述格尔德霉素及其类似物通过以下方法制备获得:
(1)发酵菌株选择:发酵菌株为链霉菌(Streptomyces sp.)HNBCa1,于2021年9月3日保藏于广东省微生物菌种保藏中心,其保藏登记号为GDMCC NO.61901;
(2)种子液制备:将步骤(1)中的链霉菌采用种子培养基培养,获得种子液;
(3)发酵:将步骤(2)中的种子液接种入发酵培养基中进行发酵处理,得发酵液;
(4)发酵产物的提取:将步骤(3)中的发酵液过滤,取菌液采用乙酸乙酯萃取,得萃取液,取菌体用甲醇-二氯甲烷混合液浸提,得浸提液,将萃取液和浸提液合并后减压浓缩,得含有格尔德霉素及其类似物的粗提物;
(5)格尔德霉素及其类似物的分离:将粗提物过正相硅胶色谱柱、反相硅胶色谱柱、葡聚糖凝胶色谱柱和半制备高效液相色谱分离,得到格尔德霉素及其类似物。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征是:步骤(2)中所述种子培养基含有:胰酪胨15~20g、大豆木瓜蛋白酶水解物2~4g、氯化钠4~6g、磷酸氢二钾2~3g、葡萄糖2~3g、蒸馏水1L,所述种子培养基的pH为7.3±0.2;采用种子培养基培养时,在28~30℃、150~170rpm条件下振荡培养3~5天。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征是:步骤(3)中所述发酵培养基含有:可溶性淀粉15~25g、蛋白胨4~6g、麦芽提取物2~4g、酵母提取物2~4g、葡萄糖8~12g、碳酸钙0.5~1.5g、蒸馏水1L,所述发酵培养基的pH为7.0;按照5~15%的接种量(体积百分含量)接种种子液到发酵培养基中,在28~30℃、150~170rpm条件下振荡发酵9~13天。
8.根据权利要求5所述的应用,其特征是:步骤(4)中所述乙酸乙酯与所述菌液等体积,所述甲醇-二氯甲烷混合液中所述甲醇和二氯甲烷的体积比为1:1。
9.根据权利要求5所述的应用,其特征是:步骤(5)中将粗提物过正相硅胶色谱柱时,用体积比为100:0、100:1、100:2、100:4、100:8、100:16、100:32、100:64、0:100的氯仿-甲醇梯度洗脱,得到9个极性段Fr.A~Fr.I;其中将Fr.D和Fr.F分别经过反相硅胶色谱柱、葡聚糖凝胶色谱柱和半制备高效液相色谱仪得到化合物1和化合物2,将Fr.G经过正相硅胶色谱柱、反相硅胶色谱柱、葡聚糖凝胶色谱柱和半制备高效液相色谱仪得到化合物3。
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