[发明专利]一种乳酸克鲁维酵母菌及其分离和培养方法在审
申请号: | 202210386801.0 | 申请日: | 2022-04-14 |
公开(公告)号: | CN114456956A | 公开(公告)日: | 2022-05-10 |
发明(设计)人: | 王佳勇;刘建忠;姚奕 | 申请(专利权)人: | 中义(北京)健康研究院 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N1/02;C12R1/645 |
代理公司: | 北京天盾知识产权代理有限公司 11421 | 代理人: | 张彩珍 |
地址: | 101520 北京市密云区兴盛南路8*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 乳酸 克鲁 酵母菌 及其 分离 培养 方法 | ||
本发明公开了一种乳酸克鲁维酵母菌及其分离和培养方法,菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.24369,26S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示,菌株ZY‑001。本发明公开的乳酸克鲁维酵母菌菌落形态规则,大而厚,卵圆状,湿润略干燥,菌落质地均匀,容易挑起,有发酵香气水果香气,细胞形态为球形或橄榄形。
技术领域
本发明涉及微生物技术领域,特别涉及一种乳酸克鲁维酵母菌及其分离和培养方法。
背景技术
酵母菌是被人类运用最早的微生物,也是人类生产生活必不可少的菌种,在自然界广泛分布,可将糖发酵为二氧化碳和酒精,广泛应用于面粉、酸奶、酒类等产品的发酵。酵母菌也被证明有益生功能,可调节肠道平衡,提高机体免疫功能,因此多作为饲料添加剂用于畜禽养殖。
乳酸克鲁维酵母菌(Kluyveromyces lactis)是克鲁维酵母属下的一种酵母菌,研究开始于上世纪50年化末。当时获得的大部分该酵母菌株都分离自系列的牛奶制品中,如马奶酒、希腊奶酪等乳制品。乳酸克鲁维酵母是生物技术科学领域非常重要的非酿酒酵母之一,其意义主要体现在两个方面:在食品行业中安全应用的历史和工业规模化生产酶的能力。
乳酸克鲁维酵母菌表达系统同巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris,P.pastoris)、汉逊酵母 (Hansenula polymorpha) 以及酿酒酵母(S.cerevisiae) 表达系统并称为“酵母四大表达系统”,具有易培养、成本低廉、繁殖快、便于大规模培养和高密度发酵等特性。
酵母菌也是基因克隆实验中常用的真核生物受体细胞,基因组比较简单,仅为大肠杆菌的3-4倍,易于操作,遗传背景清楚,加之其突变株又易于分离,是研究高等真核生物基因功能的理想模式生物。正像离不开大肠杆菌的操作一样, 一个向深度发展的分子生物学实验室离不开酵母实验操作。乳酸克鲁维酵母菌作为克鲁维酵母属下的一种酵母菌也可运用于基因克隆中真核生物受体细胞,作为克隆载体。
发明内容
本申请的一个目的在于提供一种乳酸克鲁维酵母菌。
本申请的另一个目的在于提供一种分离和培养所述乳酸克鲁维酵母菌的方法。
本申请提供的乳酸克鲁维酵母菌,其生物材料的分类命名:乳酸克鲁维酵母Kluyveromyces lactis,保藏单位名称为:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏日期为:2022年01月24日,保藏编号为:CGMCC No. 24369,菌株命名为ZY-001。
本申请提供的乳酸克鲁维酵母菌菌落形态规则,大而厚,卵圆状,湿润略干燥,菌落质地均匀,容易挑起,有发酵香气水果香气,细胞形态为球形或橄榄形。
本申请提供的乳酸克鲁维酵母菌的26S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示,经与GenBank数据库中已知26S rDNA序列同源性对比,确认本发明提供的乳酸克鲁维酵母菌菌株ZY-001为乳酸克鲁维酵母菌。
本申请提供的分离和培养所述乳酸克鲁维酵母菌的方法
包括如下步骤:
对采集的标本进行预处理分离获得菌落;
基于分离获得的菌落培养出酵母菌真菌。
优选的,所述预处理分离获得菌落的步骤包括:将采集的标本用无菌海水清洗,剪碎后置于GYP固体培养基上培育。
优选的,所述预处理分离获得菌落的步骤包括:将采集的标本剪碎后放入无菌培养皿中, 加入含有抗生素青霉素 G和链霉素的无菌海水培养, 吸取培养后涂布于GYP固体培养基上培养。
优选的,每升反渗透水中加入氯化钠28~32g,混匀后在高压蒸汽灭菌设备中,在103~104kPa 和119~123℃条件下灭菌15~30min。
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