[发明专利]一种红藻蛋白活性肽及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种红藻蛋白活性肽及其制备方法和应用，制备方法包括红藻预处理、冻融提取、超滤除杂、酶解、膜过滤纯化与浓缩、干燥，得红藻蛋白活性肽。本发明将酶高效降解优势与膜快速分离纯化优势相结合，有助于提高酶解反应效率和活性肽的收率；过程易控，成本低，利于工业化生产。本发明制得的红藻蛋白活性肽具有促体内外益生菌增殖、抗肠炎和免疫调节的作用，综合改善亚健康状态；可单独或作为组件，广泛应用于药物、特殊医学用途配方食品、特殊营养配方食品、保健食品、食品或食品添加剂，有利于拓展红藻在保健食品和医药产业的应用范围。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种红藻蛋白活性肽及其制备方法和应用。

背景技术

益生元是一种膳食补充剂，指选择性刺激一种或几种细菌在宿主肠道内生长或活化，增进宿主健康而又不被宿主胃肠道消化的物质。当前益生元主要包括各种寡糖类物质、低聚糖 (由2～10个分子单糖组成)、膳食纤维等糖类，主要为益生菌提供碳源营养素的益生因子。而蛋白类或低聚肽等氮源类益生元研究较少，仅有酪蛋白的水解物、乳清蛋白、乳铁蛋白被用作益生元，海洋来源的低聚肽类益生元更是鲜有报道。

红藻、紫菜、江蓠在海洋中广泛存在，资源丰富。紫菜和江蓠干藻中粗蛋白含量达25％～50％，富含膳食纤维、多种维生素及钙、钾、镁等微量元素，还含藻类特有的藻胆蛋白，具有很高的营养价值和生理活性，在食品和医药领域具有广阔的前景。随着红藻生物活性肽多种活性的发现，从生物活性肽的角度去研究蛋白质，将为有效利用蛋白质及阐明各种蛋白质的不同作用开辟新途径。

目前，红藻生物活性肽的抗氧化、增强免疫力、抗过敏、抗肿瘤、降血压作用，已有报道，而红藻蛋白肽的其他生物活性，如促益生菌增殖、抗肠炎功效目前研究尚未涉及。通常情况下，蛋白质主要是通过化学降解、发酵、酶解的方法获得生物活性肽。在不同藻类酶解制备生物活性肽的报道中，常采用复合酶法；如发明专利CN106119327A公开一种从海藻中提取低聚肤制作海藻低聚肤粉的方法，利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰酶、木瓜蛋白酶、风味酶等，从孔石莼、鼠尾藻、裙带菜和螺旋藻中提取低聚肽，经膜过滤、电渗析、活性炭精制、脱炭、蒸发浓缩、干燥等过程制得海藻低聚肽粉。该法通过果胶酶作用对上述海藻薄壁进行初步破壁，但由于不同海藻的胞壁结构与组成存在极大差异，果胶酶仅能对其中含量极低的果胶及其类似成分进行降解，不能对所述藻类有效破壁且破壁效率低，对蛋白的提取促进作用有限；且增加了工艺复杂性和成本。同时，破壁酶的使用产生低分子糖类，为其后续蛋白肽的纯化过程增添了额外杂质和难度。

另一方面，现有研究表明，不同藻类中蛋白的组成结构有极大的差异，如红藻中蛋白主为藻红蛋白、藻蓝蛋白、别藻蓝蛋白等组成的藻胆蛋白，在不同红藻藻种中藻胆蛋白组成因存在差异，该方法统一使用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰酶、木瓜蛋白酶、风味酶对不同海藻综合作用，所得蛋白肽组成存在差异，难以控制其酶解进程和批次间产物稳定性。该法的后续采用膜过滤、电渗析、活性炭精制、脱炭、蒸发浓缩等手段对蛋白肽进行纯化和浓缩，过程复杂，成本高，不利于工业化生产。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种红藻蛋白活性肽及其制备方法和应用，可有效促益生菌增殖，并具有抗肠炎功效，拓展红藻在保健食品和医药产业的应用范围的目的。

为达到上述目的，本发明的技术方案如下：

一种红藻蛋白活性肽的制备方法，包括如下步骤：

(1)预处理：将干燥后的红藻用粉碎机粉碎，过10～80目筛，与水按重量体积比1:15～ 50比例充分混匀，复水一定时间；新鲜红藻与水按重量体积比1:1～30比例混合；用胶体磨匀浆，得红藻浆液；

(2)冻融提取：将步骤(1)中所得红藻浆液于-15～-80℃下完全冷结，在2℃～室温下溶解，反复冻融3次，然后离心取上清液，得红藻蛋白粗提液；

(3)超滤除杂：将步骤(2)中得到的红藻蛋白粗提液进行超滤，除去小分子杂质，得红藻蛋白纯化浓缩液；