[发明专利]一种可以分泌纤维膨胀蛋白的工程菌株、构建方法及应用

权利要求书

1.一种可以分泌纤维膨胀蛋白的工程菌株，其特征在于：所述菌株为带有用于重组表达纤维膨胀蛋白基因Clocl-1298的热纤梭菌工程菌。

2.根据权利要求1所述的工程菌株，其特征在于：所述菌株为将热纤梭菌cel9K中SEQID No:1的核苷酸序列替换为纤维膨胀蛋白基因Clocl-1298重组得到的工程菌。

3.根据权利要求1或2所述的工程菌株，其特征在于：所述纤维膨胀蛋白基因Clocl-1298来源于克莱弗雷梭菌（Clostridium clarifavum）DSM19732。

4.权利要求1所述的可以分泌纤维膨胀蛋白的工程菌株的构建方法，其特征在于：将纤维膨胀蛋白基因Clocl_1298重组表达到热纤梭菌基因组上，得到可以分泌纤维膨胀蛋白的工程菌株。

5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于：将热纤梭菌基因组上cel9K基因中如SEQ ID No:1所示的核苷酸序列替换为纤维膨胀蛋白基因Clocl-1298的基因序列，得到重组热纤梭菌工程菌。

6.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于：所述纤维膨胀蛋白基因Clocl-1298的核苷酸序列如SEQ ID No:2所示。

7.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于：所述热纤梭菌为热纤梭菌（Clostridium thermocellum）PN2102，保藏日期为 2021年07月09日，保藏单位为中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号分别为CGMCC No.22869。

8.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于包括步骤：（1）设计及构建纤维膨胀蛋白基因插入的重组质粒PUC-Clocl-1298；（2）将重组质粒PUC-Clocl-1298转入热纤梭菌；（3）挑选及PCR验证阳性单克隆，得到重组热纤梭菌工程菌株。

9.权利要求1所述的可以分泌纤维膨胀蛋白的工程菌株在木质纤维素水解中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：将热纤梭菌工程菌的厌氧发酵发酵液复配纤维素酶对秸秆纤维进行水解。