[发明专利]赤芝二醇和甘油-3-磷酸胆碱作为生物标志物在检验木瓜热处理有效性中的应用

说明书

本发明提供了一种赤芝二醇和甘油‑3‑磷酸胆碱作为生物标志物在检验木瓜热处理有效性中的应用，属于代谢组学检测技术领域。本发明通过代谢组学检测，以赤芝二醇和甘油‑3‑磷酸胆碱作为生物标志物，并进行数据分析，即可准确、直观的确定木瓜果实是否进行了有效热处理。判别是否进行热处理，且热处理是否有效，仅需要对比热处理前、后木瓜果实赤芝二醇和甘油‑3‑磷酸胆碱是否有显著差异，且该两种物质的物质浓度的Log₂的折叠倍数的绝对值是否＞1即可。

技术领域

本发明属于代谢组学检测技术领域，尤其涉及一种赤芝二醇和甘油-3-磷酸胆碱作为生物标志物在检验木瓜热处理有效性中的应用。

背景技术

木瓜，是番木瓜科常绿软木性乔木，原产墨西哥，17世纪时传入我国，是一种在热带、亚热带地区广泛种植的果树，近年来，在我国南方的种植面积越来越大。木瓜全身是宝，既是名果又是特殊的原料作物。果实含糖、蛋白质、钙和多种维生素，尤其是维生素A、维生素B、维生素C等含量丰富，还具有正气、助消化、治胃病的作用。其青果中含的木瓜酶在医学、化妆和食品工业中都有广泛应用。木瓜可加工成各种制品，青果还可作蔬菜食用也是很好的家禽饲料。

热处理是指果蔬采摘后经过适宜温度的处理，抑制病原菌的产生，调节果蔬内部酶活性，提高果蔬抗逆性，最终使得果蔬在贮臧过程中保持良好的保鲜品质。由于热处理具有耗能少、投资少、简单有效、无毒无农残等优点，已经成为国内外广泛研究的一种物理保鲜技术。在木瓜、香蕉、桃、芒果、草莓、苹果等多种水果上均产生了有效的保鲜效果。虽然热处理对果实品质、软化、抗病性方面具有有益效果，但要注意的是，在实际应用中，会由于果实品种、成熟度甚至其贮藏条件的不同，要选择适宜的热处理条件，才可以达到延长果实保藏期的效果。而如何有效、准确、快速的检测果蔬、尤其木瓜果实是否进行了有效的热处理，当前技术中并未有相关研究。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种赤芝二醇和甘油-3-磷酸胆碱作为生物标志物在检验木瓜热处理有效性中的应用和检测方法，以赤芝二醇和甘油-3-磷酸胆碱作为生物标志物，对木瓜热处理前、后的果实品质进行检测，准确判断木瓜热处理的有效性。

为了实现上述发明目的，本发明提供了赤芝二醇和甘油-3-磷酸胆碱作为生物标志物在检验木瓜热处理有效性中的应用。

本发明还提供了一种检测木瓜热处理有效性的方法，包括以下技术方案：对热处理前、后的木瓜果实材料进行代谢组学检测以及OPLS-DA分析，采用t-test检测，当赤芝二醇和甘油-3-磷酸胆碱有显著差异，且两种物质的物质浓度的Log₂的折叠倍数的绝对值＞1，表明木瓜热处理有效。

优选的是，所述代谢组学检测为GC-MS分析。

更优选的是，所述GC-MS分析条件为：

色谱条件：Waters UPLC液相色谱柱，液相色谱A相为含0.1％甲酸水溶液，B相为乙腈；柱温箱温度为40℃，自动进样器温度为4℃，进样体积为2μL；

质谱条件：ESI离子源，以多反应监测MRM模式进行质谱分析。

本发明还提供了一种筛选木瓜热处理有效性生物标志物的方法，包括以下步骤：准备待热处理组和对照组木瓜果实，对待热处理组木瓜果实进行热处理，分别对热处理后木瓜果实和对照组木瓜果实进行代谢组学检测，并进行OPLS-DA分析，筛选差异性代谢物；采用t-test检测，筛选对照组与热处理组间代谢物含量有显著差异，以Log₂为底，折叠倍数大于1的差异性代谢物，即为木瓜热处理有效性生物标志物。

优选的是，所述待热处理组和对照组木瓜果实大小均一、成熟度一致。

优选的是，所述热处理采用交变湿热升温程序，待果心温度达到47.2℃后，持续处理60min。

优选的是，所述代谢组学检测为GC-MS分析。