[发明专利]负载miR13896的hucMSC-sEV在脓毒症急性肝损伤方面的应用

权利要求书

1.负载miR13896的hucMSC-sEV在制备防治或缓解脓毒症急性肝损伤的药物中的应用；

所述miR13896的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.负载miR13896的hucMSC-sEV在制备诱导巨噬细胞由M1型向M2型极化的药物中的应用；

所述miR13896的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.负载miR13896的hucMSC-sEV在制备抑制IL-1β、IL-6、TNF-α和iNOS中一种或多种mRNA表达的药物中的应用；

所述miR13896的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

4.负载miR13896的hucMSC-sEV在制备促进IL-10和/或Arg1 mRNA表达的药物中的应用；

所述miR13896的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

5.负载miR13896的hucMSC-sEV在制备降低肝功能指标的药物中的应用；

所述miR13896的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述肝功能指标包括谷丙转氨酶和谷草转氨酶。

7.根据权利要求1～6任一项所述的应用，其特征在于，所述负载miR13896的工程化hucMSC-sEV的制备方法，包括以下步骤：

将miR13896 mimics溶液与hucMSC-sEV溶液混合后进行电转；

将电转所得电转液置于37℃的条件下孵育30min，得所述负载miR13896的hucMSC-sEV。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述miR13896 mimics溶液的浓度为1μg/μL；所述miR13896 mimics溶液包括miR13896 mimics的DEPC水溶液；

所述miR13896 mimics溶液和所述hucMSC-sEV溶液的体积比为1：9。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述hucMSC-sEV的制备方法包括以下步骤：

收集hucMSC培养上清液，离心得到所述hucMSC-sEV。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述离心包括第一离心、第二离心、第三离心、第四离心、第一超滤离心、第五离心和第六离心；

所述第一离心的离心力为300g，离心时间为10min；

所述第二离心的离心力为500g，离心时间为10min；

所述第三离心的离心力为2000g，离心时间为30min；

所述第四离心的离心力为10000g，离心时间为30min；

所述第一超滤离心为100kDa超滤离心，离心力为2000g，离心时间为30min；

所述第五离心的离心力为100000g，离心时间为2h；

所述第六离心的离心力为100000g，离心时间为2h。