[发明专利]一种β-羟丁酸电化学试纸、制备方法及应用

说明书

本发明提供了一种β‑羟丁酸电化学试纸，包括电极基片、酶试剂、双面胶和亲水膜；电极基片上印刷有电极层，电极层包括工作电极和对电极；酶试剂印刷在工作电极和对电极上，且酶试剂的配比设置为：5‑7份缓冲液、0.01‑0.2份三氯化六胺合钌、0.01‑0.1份导电物质、0.1‑1.2份酶组分、0.2‑0.8份保护剂以及0.5‑1份填充剂；双面胶和亲水膜相互连接形成亲水膜层，亲水膜层覆盖于酶试剂上。本发明提供的β‑羟丁酸电化学试纸，通过采用三氯化六胺合钌作为电子媒介体，提升了该试纸的稳定性、提高该试纸的抗干扰能力、可使试纸的检测范围为0～12mmol/L以及检验样本可为全血、血清、血浆或尿液。

技术领域

本发明涉及电化学检测技术领域，特别是涉及一种β-羟丁酸电化学试纸、制备方法及应用。

背景技术

对于β-羟丁酸的检测，目前通常应用于针对糖尿病患者或者需要减肥的人员对其体内的酮体含量的检测，其中：糖尿病患者往往会伴随着筒体指标偏高的特点，而酮体是β-羟丁酸、乙酰乙酸和丙酮三者的统称，而一般情况下β-羟丁酸又约占酮体的70％，且因β-羟丁酸在人体血液中比较稳定，因此，经常用于判断血酮是否异常的指标；需要减肥的人员通常采用生酮的方式实现减肥，而通过生酮的方式实现减肥的过程是机体消耗脂肪的过程，在机体代谢过程中容易引起体内的酮体增多，从而导致尿液中出现酮体。基于此，可见高精度的检验β-羟丁酸含量对酮体、肥胖检验具有重要的意义。

现有技术中的β-羟丁酸检验方法，更多采用的是偏向于光化学显色原理，通过反应前后的光强度来换算。此种方法对于检测灵敏度和干扰较大，从而影响检测的精度；且因为检测样本基本为血清或血浆，对血液样本需要预处理等操作，不利于高灵敏检测血液或者尿酸样本的β-羟丁酸含量。

发明内容

本发明提供了一种β-羟丁酸电化学试纸，包括电极基片、酶试剂、双面胶和亲水膜；

所述电极基片上印刷有电极层，所述电极层包括工作电极和对电极；

所述酶试剂印刷在工作电极和对电极上，且所述酶试剂的配比设置为：5-7份缓冲液、0.01-0.2份三氯化六胺合钌、0.01-0.1份导电物质、0.1-1.2份酶组分、0.2-0.8份保护剂以及0.5-1份填充剂；

所述双面胶和亲水膜相互连接形成亲水膜层，亲水膜层覆盖于酶试剂上。

可选的，所述工作电极和对电极的材质均设置为碳、银-碳、金或钯-碳中的一种。

可选的，所述缓冲液设置为pH值为5.0-7.5的PBS缓冲液、HEPES缓冲液、TES缓冲液和Tris-Hcl缓冲液中的一种。

可选的，所述导电物质设置为聚吡咯、聚噻吩、二苯并噻吩、4-甲基二苯并噻吩中的一种或多种。

可选的，所述酶组分包括0.5-1份β-羟丁酸脱氢酶、0.5-1份黄递酶以及1-1.5份β-NAD+。

可选的，所述保护剂设置为0.5-1份丙烯酰胺、0.1-0.5份聚乙烯醇、0.2-0.5份羟乙基纤维素以及0.3-0.8份牛血清白蛋白的混合物。

可选的，所述填充剂设置为气相二氧化硅、氧化铝粉、硅藻土中的一种或多种。

本发明还提供了一种β-羟丁酸电化学试纸的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、制备酶试剂：

步骤1、依次将5-7份缓冲液、0.2-0.5份丙烯酰胺以及0.01-0.1份导电物质加入至容器中，并使其在35℃-37℃水浴环境下搅拌至溶解，再将溶解后的溶液置于300-360nm紫外灯下照射10-20min；