[发明专利]一种具有缓解脂多糖所致的小鼠肠道损伤的联合双歧杆菌

说明书

本发明提供了一种具有缓解脂多糖所致的小鼠肠道损伤的两歧双歧杆菌E3(BB)和长双歧杆菌婴儿亚种E4(BL)，属于微生物技术领域。本发明提供的联合双歧杆菌能增强肠道屏障功能，调节肠道黏膜免疫，减轻回肠炎症，可通过TLR4介导的NF‑κB/MAPK信号通路上调紧密连接蛋白(Occludin and Claudin‑1、ZO‑1)、粘蛋白(MUC2)的表达，抑制炎症介质(IL‑1β、IL‑6、TNF‑α)的表达。重要的是，联合双歧杆菌组调节了肠道微生物群的组成，促进短链脂肪酸(SCFA)的增加。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种具有缓解脂多糖所致的小鼠肠道 损伤的联合双歧杆菌及其应用。

背景技术

脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌(病原菌和共生菌)外膜的主要成分。人们发现， 它是一种与细菌有关的物质，叫做内毒素，能引起动物败血症休克。肠道功能障 碍对败血症的发展至关重要，这表明肠道在全身炎症反应中起着“马达”的作 用。肠道是人体最大的消化器官，肠道上皮的完整与否对肠道健康至关重要。肠 黏膜屏障的损伤可引起肠通透性增加，释放大量的促炎细胞因子，进而诱发异常 的黏膜免疫反应。近年来研究发现肠屏障功能的损害与肠易激综合征(IBS)、炎 症性肠病(IBD)等肠道疾病密切相关。促炎细胞因子可以激活与炎症相关的信号 通路，进而引起肠道炎症和症状。一项早期的研究表明，TNF-α促炎细胞因子 可以通过增加肠上皮紧密连接(TJs)的通透性来诱导上皮屏障的破坏。

双歧杆菌直接或间接地对健康有多种益处，包括防止致病微生物、高血压、 糖尿病、炎症和氧化应激等。同时，它还参与调节微生物群、免疫和抗胆固醇活 性。由于黏膜组织结构的不同，双歧杆菌主要在结肠和回肠远端发挥免疫调节活 性，其中高达46％的淋巴集结出现在回肠远端。T细胞可分为CD4+T细胞和CD8+ T细胞。CD4+T细胞也被称为T辅助细胞(Th)，在适应性免疫系统中发挥重要作 用。粘膜中的树突状细胞是toll样受体所特有的，它们驱动免疫球蛋白同型转 换为IgA，标记T和B细胞上的肠归巢受体，同时根据亚型驱动T调节或Th17。 体内研究已经证实双歧杆菌在低级别慢性炎症中具有恢复免疫标志物和肠道屏 障的能力。长双歧杆菌CECT 7347在麦醇溶蛋白诱导的动物模型中可抑制炎症细胞因子的产生，缓解CD4+T细胞介导的免疫应答。更多的研究表明，共生双歧 杆菌对肠道免疫系统的发育有很强的影响，而肠道免疫系统维持着肠道内环境的 稳定。

一项研究表明，LPS可能破坏紧密连接结构，导致粘膜通透性增加。同时， 它可以结合TLR4并激活NF-κB信号通路，释放促炎细胞因子，如IL-1β、IL-6 和TNF-α，产生局部或全身的炎症反应。双歧杆菌已被证明通过其免疫调节功 能促进健康，并已被测试用于IBD的预防和治疗。一项研究发现，在喂食婴儿双 歧杆菌的小鼠肠道免疫细胞培养中，炎症细胞因子(如TNF-α和IFN-γ)的水平 显著降低。许多研究表明，p38的激活与促炎细胞因子的表达有关，抑制p38、 JNK和ERK的磷酸化，发挥抗炎作用。因此，双歧杆菌被认为在肠道免疫平衡中 发挥着重要作用。因此基于现状，从健康婴儿肠道分离出来具有缓解脂多糖所致的小鼠肠道损伤的联合双歧杆菌具有非常重要的现实意义及应用价值。

发明内容

本发明提供了一种两歧双歧杆菌E3(Bifidobacterium bifidum E3)，于2022 年4月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，武汉，保藏编号为CCTCC M 2022384。

本发明提供了一种长双歧杆菌婴儿亚种E4(Bifidobacterium longum subsp.infantis E4)，于2022年4月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，武汉，保 藏编号为CCTCCM 2022385。

本发明提供了一种缓解脂多糖所致的小鼠肠道损伤的联合双歧杆菌，包括两 歧双歧杆菌E3(BB)和长双歧杆菌婴儿亚种E4(BL)。通过用该联合双歧杆菌干预 LPS诱导的小鼠，判断其初步预防及缓解效果。